【鸡羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒厂家】产品详情:
本试剂盒仅供研究使用。
鸡羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒使用目的:
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。
鸡羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
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鸡羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒厂家操作步骤:用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
鸡羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒厂家试剂盒组成:
| 试剂盒组成 | | 48孔配置 | | 96孔配置 | | 保存 |
| 说明书 | | 1份 | | 1份 | |
| 封板膜 | | 2片(48) | | 2片(96) | |
| 密封袋 | | 1个 | | 1个 | |
| 酶标包被板 | | 1×48 | | 1×96 | | 2-8℃保存 |
| 阴性对照 | | 0.5ml×1瓶 | | 0.5ml×1瓶 | | 2-8℃保存 |
| 阳性对照 | | 0.5ml×1瓶 | | 0.5ml×1瓶 | | 2-8℃保存 |
| 酶标试剂 | | 3 ml×1瓶 | | 6 ml×1瓶 | | 2-8℃保存 |
| 样品稀释液 | | 3 ml×1瓶 | | 6 ml×1瓶 | | 2-8℃保存 |
| 显色剂A液 | | 3 ml×1瓶 | | 6 ml×1瓶 | | 2-8℃保存 |
| 显色剂B液 | | 3 ml×1瓶 | | 6 ml×1瓶 | | 2-8℃保存 |
| 终止液 | | 3ml×1瓶 | | 6ml×1瓶 | | 2-8℃保存 |
| 浓缩洗涤液 |
(20ml×20倍)×1瓶 | | (20ml×30倍)×1瓶 | | 2-8℃保存 |
鸡羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒厂家操作程序:
1. 弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
2. 每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.。
3. 取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
4.测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
5.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的,其实际浓度应该乘以总稀释倍数。
我们用更专业、更权威的实验数据,来验证ELISA实验的严谨性,科学来不得半点假,一组实验数据的作假,就会导致实验研究的彻底作废,没人会相信了,这样的损失往往是可悲、可恨的,鸡羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒厂家浪费钱不说,时间跟人力也是一种大大的浪费,所以,每一个实验人都应该恪守实验的严谨性和真实性。选择上海素尔,您正确的选择!!
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免责声明:
1、试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2、严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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