Innova Biosciences公司是英国一家专注于生物偶联技术(bioconjugation)的企业。生物偶联即将两种分子结合在一起而形成一个杂合的偶联物(hybrid conjugate),这些偶联结合物(如标记抗体)在世界各大医院和科研机构被广泛使用。InnovaBiosciences公司开发生产“一步法”抗体标记试剂盒-Lightning-link™系列产品极大程度的简化了结合标记流程,是目前世界上操作简便的抗体标记试剂盒。 在进行多因子检测时,我们往往因不能找到多种合适的标记一抗,而不得不选用标记二抗,因此很难避免可能发生的交叉反应及繁琐的洗涤步骤。Lightening-link™抗体标记试剂盒系列,提供多种荧光蛋白、酶及荧光素标记等产品,试验操作人员可直接应用于标记一抗,从而避免了因使用二抗带来的交叉反应及非特异性结合等问题。该系列试剂盒具有以下显著特点
特点 优势
● 操作简单:一步法标记
● 快速: 手工操作时间仅30秒
● 目前世界上操作简便的抗体标记试剂盒
● 无需脱盐、透析等步骤
● 抗体回收率达
● 可提供50种标记物
● 可用于WB,IHC,ELISA,免疫荧光、流式细胞术以及荧光共振能量转移检测等
● 经济实惠,规格多样
● 可标记ug-mg 级抗体量
试剂盒组成
● 1或3(以规格而定)玻管Lightening-link™ Mix 混合物。
● 1管LL-X(X为标记物,如PE或HRP等)修饰试剂。
● 1管LL-X萃灭试剂。
操作步骤
1)在每10ul抗体样品中加入1ul的LL-Modifier修饰试剂,轻轻混匀
2)打开Ligtening-link混合物管盖,吸取步骤1已混好的抗体样品至管内冻干混合物中,用吸液器轻轻吸打1-2次,使粉末完全溶解
3)盖上玻璃瓶盖,室温(20-25°C)避光孵育3小时,或过夜
4)孵育3小时后,按每10ul抗体的量加入1ul LL-淬灭试剂,静置30分钟后即可使用
*不同的标记物,操作步骤略有不同。(操作步骤供参考,以英文原版说明书为准)
标记结合物的保存
对于任何新结合物,推荐保持于4°C条件下。如需长期保存,可添加保护剂
缓冲液及添加剂兼容性:
A. 与无胺基缓冲液兼容,包括MES,MOPS,HEPES(浓度10-50mM, pH范围6.5-8.5),LL-Modifier修饰剂提供结合反应的条件
B. 常见的盐(如氯化钠)、螯合剂(EDTA)、糖对偶联反应无影响
C. 叠氮钠(0.02%-0.1%)对结合反应有轻微影响,叠氮钠不可用于HRP标记,其为后者的YZ剂
D. 甘油(up to 50%)对结合效率无影响
E. 若无胺基的缓冲液浓度相对较高,pH值在6.6-8.5范围外,则需要加入更多的LL-midifier修饰剂(/10ul抗体),以此来调整pH值。的pH范围为7.3-7.6左右
F. 避免使用含亲核剂的缓冲液,避免还原剂如DTT和2-巯基乙醇,乙醇胺等
G. 浓度达到或稍低于20mM的Tris对结合效率有轻微的影响
Lightening-link™ 抗体/蛋白标记试剂盒
● 酶标记试剂盒
Lightning-link® Alkaline Phosphatase (AP)
Lightning-link® Glucose Oxidase
Lightning-link® Horseradish Peroxidase (HRP)
● 生物素及链霉亲和素标记试剂盒
Lightning-link® Avidin
Lightning-link® Biotin
Lightning-link® Streptavidin