葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)配制方法

葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)说明：
碱裂：解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法，可用于抽提微克级别的质粒DNA。葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)由葡萄(Glucose)。Leagene溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)由溶菌酶和TRIS等组成，pH=8.0，多用于溶解细胞壁以便提取DNA，EDTA是乙二胺四乙酸的简称，常用H4Y表示。是一种很好的氨羧络合剂。


葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)操作步骤：  
1.接种一个单菌落于LB培养基中，37℃培养至饱和状态；
2.取1.5ml培养液，离心，弃上清；  
3.用100μl GTE Solution彻底重悬沉淀，室温静置；
4.进行下游实验。


葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)配制方法：
1、配制0.0２mol??L-1EDTA标准溶液   
在台秤上称取EDTA3.5～４.0g，溶解于500 mL水中。然后转移至500 mL试剂瓶中，摇匀，贴上标签；
2、配制0.0２mol??L-1钙标准溶液   
准确称取干燥的CaCO3基准试剂0.4~0.５g（注意容量瓶与移液管的体积比）于250mL烧杯中，用少量水润湿，盖上表面皿。从杯嘴内缓缓加入１／１HCl约５ml，使之溶解。溶解后将溶液转入250mL容量瓶中，定容，摇匀，计算其准确浓度；
3、EDTA标准溶液的标定   
用移液管移取25mL标准钙溶液，加入250mL锥形瓶中，加入约25mL水，2mL镁盐溶液，５mL４０g??L-1 NaOH和约少量钙指示剂（可以用钥匙的把挑上一点即可，注意不可以多加），摇匀，使指示剂溶解，溶液呈红色，用EDTA标准溶液滴定溶液由酒红色变为蓝色，即为终点；
4、在做两次平行实验，计算EDTA标准溶液的浓度。


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温馨提示：不可用于临床ZL。