Invitrogen脂质体2000价格lipo2000说明书
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TRlzol ®Reagent:http://www.bioshhy.com/huiying2012-Products-21599348/
TRIZOL LS Reagent:http://www.bioshhy.com/huiying2012-Products-21599486/
Lipofectamine RNAiMax:http://www.bioshhy.com/huiying2012-Products-21595882/
B-27(黄颜色)不含维生素A:http://www.bioshhy.com/huiying2012-Products-21599697/
公司所提供的Invitrogen转染试剂以及抽提试剂,不能用于人体实验和临床诊断、ZL。
操作注意事项:
1、转染前一天,胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染日密度为90%。细胞铺板在0.5ml含血清,不含抗生素的正常生长的培养基中。
2、对于每孔细胞,使用50μl无血清培养基(如OPTI-MEMⅠ培养基)稀释0.8μg-1.0μg DNA。3、对于每孔细胞,使用50μl OPTI-MEMⅠ培养基稀释1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000试剂。Lipofectamine 2000稀释后保温5分钟(在30分钟内同稀释的DNA混合。保温时间过长会降低活性。) 注意:即使Lipofectamine 2000使用OPTI-MEMⅠ稀释,细胞也可以使用D-MEM培养。如果D-MEM做为Lipofectamine 2000的稀释液,必须在5分钟内同稀释的DNA混合。
4、混合稀释的DNA(第2步)和稀释的Lipofectamine 2000(第3步)。在室温保温20分钟。 注意:溶液可能会混浊,但不会影响转染。复合物可以在室温保持6小时稳定。
5、直接将复合物加入到每孔中,摇动培养板,轻轻混匀。注意:如果在无血清条件下转染,使用含血清的正常生长培养基进行细胞铺板。在加入复合物前移去生长培养基,替换为0.5ml无血清培养基。
6、在37℃,5%的CO2中保温24-48小时,无须去掉复合物或更换培养基或者在4-5小时后更换生长培养基也不会降低转染活性。
7、在细胞中加入复合物24-72小时后,分析细胞抽提物或进行原位细胞染色,检测报告基因活性。这依赖于细胞类型和启动子活性。对稳定表达,在开始转染一天后将细胞传代至新鲜培养基中,两天后加入筛选抗生素。进行稳定表达需要数天或数周。
8、对于96孔板培养,不再需要提前一天进行细胞铺板,而可以直接在平板中制备复合物,然后将细胞悬浮液加入到复合物就可以了,这样进一步减少了转染时间。这种改进步骤已经过293-H,293-F,COS-7L和CHO细胞的试验,同传统方法相比活性稍低。快捷的步骤和蛋白表达细胞系的GX转染使得Lipofectamine 2000非常适用于96孔板的高通量转染,比如cDNA文库的筛选和蛋白瞬时表达。
Invitrogen脂质体2000价格lipo2000说明书
Gibco胎牛血清,西班牙琼脂糖,Transgenomic突变检测试剂盒 大量库存
ATCC细胞,癌细胞,脂质体2000
产品名称:脂质体2000
英文名称:Lipofectamine TM 2000 Reagent
别名:Lipo2000,脂质体转染试剂,Lipofectamine 2000,lp2000脂质体
货号及规格:11668-027(0.75ML);11668-019(1.5ML)
储存温度:4°C
库存状态:现货
特惠价格:电议
Invitrogen脂质体2000价格lipo2000说明书 素尔提醒您要注意避免多次反复长时间开盖,因为可能会导致脂质体氧化而影响转染效率。当然还有要注意质粒的质量,质粒的内毒素是转染的大敌。
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