北京单细胞裂解液(RNA提取)品Pai

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京单细胞裂解液(RNA提取)品Pai，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京单细胞裂解液(RNA提取)品Pai
编号：BTN130804
规格：1mL
英文名：Single Cell Lysis Solution
品Pai：百奥莱博
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液，本裂解液经多次优化，含有多种去污剂、变性剂和盐，可有效YZ核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏，维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

想要了解更多关于北京单细胞裂解液(RNA提取)品Pai的价格、品Pai、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·*苄青霉素溶液
编号：BTN60206
英文名称：Ampicillin Solution
规格：10mL
本产品是浓度为50mg/mL的*苄青霉素溶液，用于分子生物学和组织培养(防止微生物污染和抗性筛选)。

作用原理：能使细菌细胞膜内层的transpeptidase(转肽酶)失活从而YZ细菌细胞壁的合成。

抗性机制：抗性基因bla能特异性表达外周质酶β-lactamase(β-内酰胺酶)，该酶可切割*苄青霉素的β-内酰胺环从而使之失活。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期6个月。

·平末端DNA加A试剂盒
编号：BTN60105
英文名称：dA Tailing Kit
规格：50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dATP 存在的情况下，在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴，使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下：


产品特点：
1. 简单，2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。

试剂盒组成：

 

成分	规格
Taq DNA polymerase(5U/μL)	50μl
2×Tailing Buffer	1.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：反应前纯化处理：
用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/*仿抽提或Proteinase K处理)，否则它们将在加A反应时，切除掉加上的A尾巴，干扰反应。可以采取胶回收和酚/*仿抽提法等常规方法纯化，ZH溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。
二：加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入下列成分：

回收的DNA片段	0.2-2ug
2×dA Tailing Buffer	25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL)	1μL
补水到	50μL
72℃保温2小时

三：反应后处理
加A反应后，Taq DNA pol


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·软骨RNA提取试剂盒
编号：BTN70401
英文名称：Cartilage RNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒专门从各种软骨组织样品中快速提取总RNA的试剂盒，它能有效克服传统TRIzol方法提取软骨组织RNA时，十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。

试剂盒特点：
1. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染，OD260/280一般均在1.9以上。
2. RNA产率一般为5-15μg/100mg。
3. 操作简单，整个提取过程一般只需要10多分钟。
4. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA纯化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	25ml
溶液D	25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将50-200mg新鲜或冷冻的软骨组织液氮研磨成粉，加入1mL溶液A(使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解)溶解，然后将研磨物转移到新的1.5mL离心管中，振荡混合30秒。也可以将软骨组织剪碎后与溶液A一起匀浆，再转移到离心管中。
2.在装有研磨物/匀浆物的离心管中加入0.3mL的溶液B，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
3. 加入0.2mL自备*仿，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000～15000g离心2-5分钟。
5. 将上清液(约0.8mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入0.5mL的溶液C，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7. 加入0.2mL的自备*仿，振荡器振荡30秒混匀。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
8.室温12000～15000g离心3分钟，两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
9. 将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
10.在上清液中加入0.5倍体积的溶液D，振荡器振荡30秒混匀，此时溶液呈白色浑浊状。注意：振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
11.室温12000～15000g离心5-10分钟，RNA将在管底形成白色沉淀(约黄豆大小)。如果组织样品量少或需要提高RNA回收率，也可以延长离心时间到20-30分钟。
12.在离心管中加入1mL 75%的乙醇，振荡器上振荡混匀30秒。
13.室温12000～15000g离心5分钟，RNA将在管底形成细小沉淀(约芝麻大小)。
14. 重复上步75%的乙醇洗涤一次，RNA将在管底形成细小沉淀。
15.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
16. 再短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留液。注意：不要吸弃沉淀。此步将有效去除残留的乙醇，否则后续反应会受到影响。
17. 加入适量(一般为20-50μl)RNase-free水使RNA沉淀溶解，存放于-80℃或立即使用。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA将变得十分难溶。
18. 检测

a)RNA完整性的电泳检测
如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。如果是简单检测，可以使用TAE或百奥莱博的SuperBuffer-2 DNA/RNA两用快速电泳液，但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques，9：558，1990)。普通DNA上样液不含变性剂，也没经过去RNase处理，所以不要使用。
尤其需要注意的是不要使用TBE进行RNA电泳，因为TBE所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分，硼*(代"酸")通过与RNA核糖中的羟基发生络合反应，形成RNA分子内或RNA分子间的络合复合物，使同样长度的RNA具有不同的泳动速度，电泳条带弥散，同时有大的RNA络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关，而RNA样品中污染的其他多糖也会参与此反应，使硼*(代"酸")对RNA电泳的影响更复杂，所以TBE对RNA电泳的影响没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行，是避免使用。
由于动物细胞中70-80%的RNA为rRNA，后者又由28S(约4800nt)，18S(约1900nt)和5.8S(约120nt)三种组成，所以变性胶电泳后应该在UV下看见三条清晰的rRNA带。由于核酸长度与结合EB的数量成正比(当然还与RNA的二级结构有关，双链部分结合能力比单链部分强)，所以28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA带不清晰或比例小于此范围则表示RNA有降解(因为大的RNA被酶降解的可能更大)。

b)RNA产量产率测定
将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%。

c)RNA纯度测定
无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，OD260/OD230一般在2.0-2.3之间，如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染，但一般不影响RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除，DNA和多糖污染可以分别用百奥莱博的DNA Scavenger和PS Scavenger去除。



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L-蛋*醇 D-Homophenylalanine 2899-37-8
ARB10767 人抗MI2抗体(Anti-MI2-Ab)ELISA代测服务 Human anti-mi2-antibody ELISA KIT
C0701 绵羊血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
碳酸铈 HEPPSO sodiu*(代"m") salt 54451-25-1
L-*丙*酸乙酯盐*(代"酸")盐 DL-Homophenylalanine 3182-93-2
酸性蛋白酶 SP Sephadex C-50 9025-49-4
辛乙*(代"烯")二醇单正十二烷基酯 dITP,3Na 3055-98-9
2-(7-偶氮*并三氮唑)-N,N,N",N"-四甲基脲六*磷酸酯 Bibenzyl 148893-10-1
BTN80804 柱式真菌RNAOUT Column Fungal RNAOUT
BL0971 大鼠外周血淋巴细胞分离液
ARB11618 人羟脯*酸(Hyp)elisa检测说明书 Human hydroxyproline,hyp ELISA KIT
68-04-2 Sodium Citrate  柠檬酸三*
L-天冬酰胺一水 IUPAC 5794-13-8
121714-22-5 Fluo-3,AM(*离子探针)
14375-45-2 脱落酸 Abscisic acid (ABA)
ARB11392 人神经节苷脂(GM-1)elisa测定使用说明书 Human anti-ganglioside antibody,gm1 ELISA  kit

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