蛋白Marker
Clark公司的蛋白Marker有两款:一款是市场常见,但是Clark更具性价比的预染色蛋白Marker;另一款是市场上极少见到,却是western blot过程中经常用的曝光Marker。
Clarkbio预染蛋白条带清晰锐利,使用前不需要加热、稀释或添加其他试剂,即开即用。
M101 Clark预染蛋白Marker
250ul*2
【储存条件】:-10℃到-30℃。避免反复冻融。
【运输条件】:可以室温运输。收到后请及时放到储存条件下储存。
【储存液】:125 mM Tris-HCl,pH 6.8, 10 mM DTT, 2 mM EDTA, 2 % (W/V) SDS, 10 % (W/V) Glycerol, 0.01 % (W/V)Bromophenol blue
【问题分析】
问题 | 原因 | 建议 |
背景较高 | 封闭不充分 | 延长封闭时间,选择合适的封闭液 |
印迹膜或转膜缓冲液被污染 | 确保操作过程中无污染,戴手套 |
一抗稀释倍数不当 | 调整的稀释度 |
一抗孵育时的温度较高 | 建议4℃孵育过夜 |
曝光时间过长 | 缩短曝光时间 |
信号弱或无信号 | ECL工作液不工作 | 使用有效的ECL工作液 |
转移不完全或过转移 | 优化转膜时间及转膜电流 |
抗体无效或孵育时间过短 | 更换新抗体或延长孵育时间 |
Marker上样量较低 | 通过预实验确定合适的上样量 |
条带太浓或太杂 | 抗体过量 | 优化抗体的剂量 |
Marker上样量较高 | 减少Marker的上样量 |
非特异性结合 | 提高封闭效率以及选择特异性较高的抗体 |
曝光时间过长 | 缩短曝光时间 |
温馨提示:不可用于临床ZL。