通用 miRNA 克隆接头0.83nmol售后服务注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响DY链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
通用 miRNA 克隆接头0.83nmol售后服务技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并ZD限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCRYZ物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
通用 miRNA 克隆接头0.83nmol售后服务操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
Dofetilide (5 mg) N-[4-[2-[methyl[2-[4-[(methylsulfonyl)amino]phenoxy]ethyl]amino]ethyl]phenyl]-methanesulfonamide; Tikosyn|UK 68789; Dofetilide
1-Palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-PE (25 mg) 1-palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-phosphatidylethanolamine; 1,3-POPE|1-Palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-Phosphoethanolamine; 1-Palmitoyl-3-oleoyl-sn-glycero-2-PE
ML-098 (10 mg) 1-
ID-8 (25 mg) 1-
TAF1 bromodomains 1 and 2 Europium Chelate (2100 wells) TAF1 bromodomains 1 and 2 Europium Chelate
Resolvin D2 methyl ester (25 ug) 7S,16R,17S-trihydroxy-4Z,8E,10Z,12E,14E,19Z-docosahexaenoic acid methyl ester; RvD2 methyl ester|7(S),16(R),17(S)-Resolvin D2 methyl ester; Resolvin D2 methyl ester
Tenuazonic Acid (1 mg) AAC-toxin; 3-acetyl-1,5-dihydro-4-hydroxy-5S-[(1S)-1-methylpropyl]-2H-Pyrrol-2-one
AN-7 (1 mg) 3-(5-[1,2]dithiolan-3yl-pentanoylamino)-propyl]-amide
SR 1664 (1 mg) 4’-[[2,3-dimethyl-5-[[[(1S)-1-(4-nitrophenyl)ethyl]amino]carbonyl]-1H-indol-1-yl]methyl]-[1,1’-biphenyl]-2-carboxylic acid
(±)4-HDoHE (25 ug) (±)4-hydroxy-5E,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; 4-hydroxy Docosahexaenoic Acid; (±)4-HDoHE
(±)11,12-DHET (50 ug) (±)11,12-dihydroxy-5Z,8Z,14Z-eicosatrienoic acid; (±)11,12-DiHETrE; (±)11,12-DHET
NF449 (sodium salt) (50 mg) 4,4’,4’’,4’’’-[carbonylbis[imino-5,1,3-benzenetriylbis(carbonylimino)]]tetrakis-1,3-benzenedisulfonic acid, octasodium salt
SGC-CBP30 (5 mg) 2-[2-(3-chloro-4-methoxyphenyl)ethyl]-5-(3,5-dimethyl-4-isoxazolyl)-1-[(2S)-2-(4-morpholinyl)propyl]-1H-benzimidazole
Desmosterol (10 mg) 24-dehydro Cholesterol|NSC 226126; (3β)-cholesta-5,24-dien-3-ol
PFI-3 (10 mg) (E)-1-(2-hydroxyphenyl)-3-((1R,4R)-5-(pyridin-2-yl)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-2-yl)prop-2-en-1-one
Harringtonine (10 mg) NSC 124147; 3-
3-AP (25 mg) 3-Aminopyridine-2-Carboxyaldehyde Thiosemicarbazone|NSC 663249|Triapine
Herbimycin A (500 ug) Antibiotic TAN 420F|NSC 305978; 17-demethoxy-15R-methoxy-11-O-methyl-geldanamycin
Naloxone (hydrochloride) (250 mg) N-Allyldihydro-14-hydroxynormorphinone|NIH 7890; 4,5α-epoxy-3,14-dihydroxy-17-(2-propen-1-yl)-morphinan-6-one, monohydrochloride 酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis土曲霉 Aspergillus terreus
木霉黑化链霉菌 Streptomyces nigrificans
小鼠黑色素瘤细胞L1210(小鼠白血病细胞)b16
人肺泡上皮细胞完全培养基嗜鞣管囊酵母 Pachysolen tannophilus
嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna人腺细胞
T-47D(人腺管细胞)GC-1, 鼠原细胞
休哈塔假丝酵母 Candida shehatae酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
通用 miRNA 克隆接头0.83nmol售后服务中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii镰刀菌 Fusarium sp.
IMR-32(人神经母细胞瘤细胞)胰蛋白酶(含10mL 酶解缓冲液)
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae唾液杆菌水杨素亚种 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius
尖孢镰刀菌棉花专化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum嗜热球形脲芽胞杆菌 Ureibacillus thermosphaericus
大鼠主动脉内皮细胞完全培养基BSA标准梯度浓度试剂盒(即用型)-BSA
热带假丝酵母 Candida tropicalis地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
黑木耳 Auricularia auricula三叶草根瘤菌 Rhizobium trifolii
小鼠肾系膜细胞完全培养基SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit(DAB)/Super Polymer-二步法IHC试剂盒(带DAB显色液)
总状毛霉 Mucor racemosus植物杆菌 Lactobacillus plantarum
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii爪哇香菇 Lentinus javanicus
通用 miRNA 克隆接头0.83nmol售后服务公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
温馨提示:不可用于临床ZL。