可保种型蓝白 T 载体50ng说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响DY链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
可保种型蓝白 T 载体50ng说明书详细介绍:
可保种型蓝白 T 载体50ng说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并ZD限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCRYZ物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
可保种型蓝白 T 载体50ng说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
ethyl-2-(2-pyridyl)-4-(bromomethyl)-Thiazole-5-Carboxylate (100 mg) ethyl-4-(bromomethyl)-2-(pyridin-2-yl)thiazole-5-carboxylate; ethyl-2-(2-pyridyl)-4-(bromomethyl)-Thiazole-5-Carboxylate
Resorcinolnaphthalein (5 mg) 3’,6’-dihydroxy-spiro[1H,3H-naphtho[1,8-cd]pyran-1,9’-[9H]xanthen-3-one; NSC 354317; Resorcinolnaphthalein
7(S)-Maresin 1 (100 ug) 7S,14R-dihydroxy-4Z,8E,10Z,12Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; 7(S)-MaR1|7-epi-Maresin 1; 7(S)-Maresin 1
Neurodazine (50 mg) 2-[5-(3-chlorophenyl)-2-furanyl]-4,5-bis(4-methoxyphenyl)-1H-imidazole; Neurodazine
Pyrrophenone (5 mg) N-[[(2S,4R)-1-[2-(2,4-difluorobenzoyl)benzoyl]-4-[(triphenylmethyl)thio]-2-pyrrolidinyl]methyl]-4-[(Z)-(2,4-dioxo-5-thiazolidinylidene)methyl]-benzamide; Pyrrophenone
IBMX (250 mg) 3,9-dihydro-1-methyl-3-(2-methylpropyl)-1H-purine-2,6-dione; Isobutylmethylxanthine|1-Methyl-3-Isobutylxanthine|NSC 16596IBMX
17-phenyl trinor Prostaglandin E2 ethyl amide (50 mg) N-ethyl-9-oxo-11α,15S-dihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; 17-phenyl trinor PGE2 ethyl amide; 17-phenyl trinor Prostaglandin E2 ethyl amide
WZ811 (1 mg) N1,N4-di-2-pyridinyl-1,4-benzenedimethanamine; WZ811
17β-hydroxy Wortmannin (10 mg) 17β-hydroxy-11-(acetyloxy)-1S,6bR,7,8,9aS,10,11R,11bR-octahydro-1-(methoxymethyl)-9a,11b-dimethyl-3H-furo[4,3,2-de]indeno[4,5-h]-2-benzopyran-3,6,9-trione; 17β-hydroxy Wortmannin
Auraptene (25 mg) 7-[[(2E)-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl]oxy]-2H-1-benzopyran-2-one; 7-Geranyloxycoumarin; Auraptene
tetranor-PGEM (25 ug) 9,15-dioxo-11α-hydroxy-13,14-dihydro-2,3,4,5-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; tetranor-Prostaglandin E Metabolite; tetranor-PGEM
Prostaglandin F2α isopropyl ester (10 mg) 9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, isopropyl ester; Dinoprost isopropyl ester|PGF2α isopropyl ester; Prostaglandin F2α isopropyl ester
Unoprostone isopropyl ester (5 mg) 9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-13,14-dihydro-15-oxo-20a,20b-dihomoprost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto-20-ethyl Prostaglandin F2α isopropyl ester|Rescula; Unoprostone isopropyl ester
Hexadecanal-d5 (500 ug) hexadecanal-15,15,16,16,16-d5; 16-Hexadecanal|Palmitaldehyde; Hexadecanal-d5 人肾细胞泡盛曲霉 Aspergillus awamoriKetr-3
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞淡紫拟青霉 Paecilomyces lilacinus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeHela(人宫颈细胞)
香菇 Lentinus edode酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
CaES-17(人食管细胞)球孢白僵菌 Beauveria bassiana
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基
炭样小单孢菌 Micromonospora carbonacea酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
人卵巢细胞柄木霉*HO-8910
小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记)小鼠颌下腺上皮细胞完全培养基
可保种型蓝白 T 载体50ng说明书酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人肺大动脉平滑肌细胞完全培养基
泾阳链霉菌 Streptomyces jingyangensis嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus
QGY-7703(人肝细胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
植物杆菌 Lactobacillus plantarumSW579(人甲状腺鳞细胞 )
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti许旺酵母 Schwanniomyces occidentalis
NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞)中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiigersion
嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilusII型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)
黑球漆斑菌酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人结肠紫杉醇耐药公牛链霉菌 Streptomyces tauricusHCT/Taxol
可保种型蓝白 T 载体50ng说明书公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
温馨提示:不可用于临床ZL。