常用PCR引物100uL说明书

常用PCR引物100uL说明书实验步骤：
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响DY链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
常用PCR引物100uL说明书特点
1.离心柱法；
2.快速：30min内即可完成全部操作；
3.得率高：无需裂解红细胞，直接从全血中提取DNA，可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA；
4.操作简便：无需水浴，全部提取操作可在室温下进行；
5.高质量：所提取的DNA纯度高、得率高，可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
常用PCR引物100uL说明书客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
●4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
●详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
常用PCR引物100uL说明书注意事项：
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响DY链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
常用PCR引物100uL说明书实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
BW A868C （1 mg）    3-[（2-cyclohexyl-2-hydroxyethyl）amino]-2，5-dioxo-1-（phenylmethyl）-4-imidazolidineheptanoic acid； BW A868C
ethyl-2-（2-pyridyl）-4-（bromomethyl）-Thiazole-5-Carboxylate （250 mg）    ethyl-4-（bromomethyl）-2-（pyridin-2-yl）thiazole-5-carboxylate； ethyl-2-（2-pyridyl）-4-（bromomethyl）-Thiazole-5-Carboxylate
ThioFluor 623 （10 mg）    N-[4-[（1E）-2-[4-cyano-5-（dicyanomethylene）-2，5-dihydro-2，2-dimethyl-3-furanyl]ethenyl]phenyl]-N-[2-[2-（2-methoxyethoxy）ethoxy]ethyl]2，4-dinitro-benzenesulfonamide； Fluorescent Thiol Probe； ThioFluor 623
7（S）-Maresin 1 （50 ug）    7S，14R-dihydroxy-4Z，8E，10Z，12Z，16Z，19Z-docosahexaenoic acid； 7（S）-MaR1|7-epi-Maresin 1； 7（S）-Maresin 1
trans-Zeatin （100 mg）    2E-methyl-4-（9H-purin-6-ylamino）-2-buten-1-ol； trans-Zeatin
HNHA （10 mg）    N-hydroxy-7-（2-naphthalenylthio）-heptanamide； Histone Deacetylase Inhibitor VI； HNHA
IBMX （500 mg）    3，9-dihydro-1-methyl-3-（2-methylpropyl）-1H-purine-2，6-dione； Isobutylmethylxanthine|1-Methyl-3-Isobutylxanthine|NSC 16596IBMX
E-64d （10 mg）    3-[[[（1S）-3-methyl-1[[（3S-methylbutyl）amino]carbonyl]butyl]amino]carbonyl]-2S-oxiranecarboxylic acid， ethyl ester； Aloxistatin|E-64c ethyl ester|EP 453|EST|Loxistatin|NSC 694281； E-64d
WZ811 （25 mg）    N1，N4-di-2-pyridinyl-1，4-benzenedimethanamine； WZ811
17β-hydroxy Wortmannin （500 ug）    17β-hydroxy-11-（acetyloxy）-1S，6bR，7，8，9aS，10，11R，11bR-octahydro-1-（methoxymethyl）-9a，11b-dimethyl-3H-furo[4，3，2-de]indeno[4，5-h]-2-benzopyran-3，6，9-trione； 17β-hydroxy Wortmannin
Auraptene （50 mg）    7-[[（2E）-3，7-dimethyl-2，6-octadien-1-yl]oxy]-2H-1-benzopyran-2-one； 7-Geranyloxycoumarin； Auraptene
tetranor-PGEM （100 ug）    9，15-dioxo-11α-hydroxy-13，14-dihydro-2，3，4，5-tetranor-prostan-1，20-dioic acid； tetranor-Prostaglandin E Metabolite； tetranor-PGEM
Prostaglandin F2α isopropyl ester （50 mg）    9α，11α，15S-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid， isopropyl ester； Dinoprost isopropyl ester|PGF2α isopropyl ester； Prostaglandin F2α isopropyl ester
Lumula （1 mg）    N-ethyl-9。alpha。，11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-20a，20b-dihomoprost-5-en-1-amide； Maxeyprost|Unoprostone N-ethyl amide； Lumula
CAY10580 （10 mg）    2-（3-hydroxyoctyl）-5-oxo-1-pyrrolidineheptanoic acid； CAY10580
15-deoxy-Δ12，14-Prostaglandin J2 （1 mg）    11-oxo-prosta-5Z，9，12E，14E-tetraen-1-oic acid； 15-deoxy-Δ12，14-PGJ2； 15-deoxy-Δ12，14-Prostaglandin J2
N-acetyl Leukotriene E4 （25 ug）    5S-hydroxy-6R-（S-（N-acetyl）cysteinyl）-7E，9E，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid； N-acetyl LTE4； N-acetyl Leukotriene E4
13（S）-HODE-d4 （100 ug）    13S-hydroxy-9Z，11E-octadecadienoic-9，10，12，13-d4 acid； 13（S）-HODE-d4
9（R）-HODE cholesteryl ester （25 ug）    9R-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic acid， cholesteryl ester； 9（R）-HODE cholesteryl ester
TMB Substrate Solution （12 ml）    TMB Substrate Solution
6-keto Prostaglandin F1α EIA Standard （1 ea）    6-keto Prostaglandin F1α EIA Standard杆菌属 Lactobacillus sp.酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti大肠杆菌 Escherichia coli
TE-1(人食管细胞)Dami(人巨核细胞白血病细胞)
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis酒假丝酵母 Candida kefyr
猴菌豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
胶冻样芽胞杆菌 Bacillus mucilaginosusMiaPaCa-2, 人细胞
III型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
椭孢青霉 Penicillium ellipsoideosporum玫瑰栗色链霉菌 Streptomyces rosecastaneus
东方拟无枝酸菌 Amycolatopsis orientalis人成骨细胞完全培养基
BxPC-3, 人原位腺细胞株普通变形杆菌 Proteus vulgaris
常用PCR引物100uL说明书地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis胶韧革菌 Gloeostereum incarnatum
三叶草根瘤菌 Rhizobium trifolii苏木素染色液
SW 982(人滑膜肉瘤细胞)大鼠外周血白细胞完全培养基
植物杆菌 Lactobacillus plantarum屎肠球菌 Enterococcus faecium
粗柄羊肚菌 Morchella crassipas中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
人小脑颗粒细胞完全培养基NCI-H358(人非小细胞肺细胞)
PANC-1, 人细胞杆菌属 Lactobacillus sp.
地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumNCI-H460(人肺细胞)
Caki-1(人肾透细胞细胞)小鼠肝实质细胞完全培养基
爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠肺大动脉内皮细胞完全培养基
微黄八叠球菌 Sarcina subflava微紫青霉 Penicillium janthinellum