EPCAM重组蛋白主要有原核表达系统和真核表达系统和无细胞表达系统。
英文名称:Recombinant Epithelial Cell Adhesion Molecule (EPCAM)
CD326; TACSTD1; EGP; KSA; M4S1; MIC18; TROP1; HEGP2; ESA; Epithelial glycoprotein; Adenocarcinoma-associated antigen; Tumor Associated Calcium Signal Transducer 1
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物种Homo sapiens (Human,人)相同的名称,不同的物种。来源原核表达宿主E.coli内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)亚细胞定位细胞膜, 分泌预测分子量25.9kDa实际分子量28kDa(差异分析请参阅说明书)片段与标签Arg25~Ser234 with N-terminal His Tag缓冲液成份20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)性状冻干粉纯度> 90%等电点8.2应用Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,请参见活性蛋白。规格10ug50ug200ug1mg1g
用法:Reconstitute in 20mM Tris, 150mM NaCl (pH8.0) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.
EPCAM重组蛋白储存:避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月。
稳定性:热稳定性以损失率显示。损失率是由加速降解试验决定,具体方法如下:在37°C孵育48小时,没有显著的降解或者沉淀产生。保质期内,在适当的条件下存储,损失率低于5%。
总体解决方案 |
服务 | 蛋白质 | 系统 | 规模 |
>表达 >净化 >复性 >表征 >目标基因合成 >载体建设 >突变 | >亲和标记的蛋白 >无标记的蛋白 >聚集的蛋白 >膜蛋白 >困难蛋白 >15N/13C标记蛋白 | >细菌 >酵母 >昆虫 >哺乳动物 在体外翻译 | >常规规模研究 >大规模行业应用 |
EPCAM重组蛋白稳定性:
1、 蛋白质展开的自由能变化,在液体中介于展开和折叠状态间的蛋白的dG和平衡常数。这可以给出一个蛋白抵抗如温度和尿素浓度的变性条件的能力的估计。这也是一个比较两种蛋白稳定性的可靠的参数。我们称它为JD稳定
2、 在实际条件下的蛋白质的稳定性。这测量的是在一个给定的条件下随时间变化的蛋白质的结构和功能。它决定一个活性蛋白质的半寿期。我们把它叫做相对稳定
蛋白质聚合
EPCAM重组蛋白形成低聚合物但是仍然是溶解的。其结果是,这种聚合不可以通过肉眼观察到。我们提供两种方法来确定蛋白质聚合:
1、 尺寸排阻色谱仪;
2、 动态光散射(DLS);
圆二色性测定蛋白质结构(CD);
圆二色性是一种常用的确定一个蛋白质结构的方法。它确定;
1、 二级结构,特别是蛋白质中的α-螺旋结构的含量;
2、 蛋白质是否是被展开的;
3、 蛋白质的稳定性;
注意事项
1. 选择表达载体时,要根据所表达蛋白的ZZ应用考虑。如为方便纯化,可选择融合表达;如为获得天然蛋白,可选择非融合表达。
2. 融合表达时在选择外源DNA同载体分子连接反应时,对转录和转译过程中密码结构的阅读不能发生干扰。
3. 菌液OD值要小于1,否则细胞太浓太老,不易破碎,且质粒易丢失。
4. 诱导时间做一个梯度,不同蛋白诱导时间需摸索。
温馨提示:不可用于临床ZL。