特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京现货SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)品Pai在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京现货SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)品Pai
编号:XH105
规格:100T
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, 生物素化二抗:浓缩液100ul。
3, SABC-FITC:浓缩液100ul。
4, SABC-POD:浓缩液100ul。
5, 稀释液:30ml。
6, 显色液:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B
7, 抗荧光衰减封片剂
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔IgG/山羊的免疫组化实验. DAB及FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖*酸。
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC,刚可省掉此步)。蒸馏水洗3次。
2.热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
5.根据使用量,用稀释液将生物素化二抗浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
如果想用荧光观察,请接下面步骤,如果想用DAB显色,请跳过6-7。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
如果想用DAB显色,请接8。
8.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
9.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
10.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2(如果FITC,刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
北京现货SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)品Pai极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·BL21(DE3)pLysS受体菌
编号:XH048
规格:1ml
基因型::F_ ompT hsdS B(rB_mB_)dcm gal (DE3)pLysS Cam r
细胞种类
GX表达宿主菌BL21(DE3)pLysS
该菌株带有质粒pLysS,具有*霉素抗性。该质粒含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。该菌适合毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
保存:所有受体菌均为甘油保存,-70℃可长期保存,-20℃可保存一年。
·非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)
编号:XH020
规格:10ml/100ml
非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过GXYZRNase的活性而保存RNA的完整性。
此产品有些公司又叫组织RNA保存液,或者RNAlocker。实际功能是相同的。
储存条件:15~25℃,有效期2年。。低温条件下有结晶析出时加热至37℃溶解后使用。
产品特点
1.操作简单,将组织剪薄浸没在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。
2.替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.RNA完整,因RNAwait能迅速YZ组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4.方便运输,处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。
5.反复冻融,经RNAwait处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响ZZ提取的RNA的质量。
6.结果准确,RNAwait进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就得以锁定,故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强,RNAwait能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8.兼容性广,处理过的样品可以使用TRIzol 等试剂提取其RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA的质量。
技术指标
37℃ 一天(保存三天的样品RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存两周的样品RNA有轻微降解)
2-8℃ 一个月
-20℃和-80℃ 长期
操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×107细胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原则是:量宁多勿少。建议在实际操作中不要称量组织,而直接根据目测结果加入RNAwait量,以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块,体积为125mm3=125µl,故应当加入1.25ml的RNAwait液。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中。
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,较小的组织直接取下,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0.5 cm的任意片状后保存,较小的组织(如大鼠的肾脏、,小鼠的大部分器官)则可以直接浸入RNAwait。
4. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的最长存放时间(请看技术指标),如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在4℃放置过夜后再转移到ZH的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要弃掉保护液。
注意事项:
1.组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2.冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3.保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复温到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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ARB14222 人肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)Elisa方法检测
F050319 豚鼠IgG抗体 Guinea Pig IgG
BTN100539 胰凝乳蛋白酶YZ剂溶液 Chymostatin Solution
146-68-9 INT 碘硝基*化四氮唑蓝
ARB10178 人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)含量检测 Human alpha1 antichymotrypsin,aact ELISA KIT
BL0956 胶体金标记兔抗鸡IgG抗体
BTN131085 亲和素 Avidin
ARB12766 小鼠NA-K-ATP酶含量分析 Mouse na-k-atp ELISA KIT
ARB10548 human皮质醇(CortIsol)ELISA代测服务 Human cortisol ELISA KIT
柠嗪酸 (+)-Usniacin 99-11-6
三硅酸* Bishydroxycoumarin 14987-04-3
ARB12117 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联免疫定量检测 Rat soluble endothelial protein c receptor,sepcr ELISA KIT
ARB12565 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)代做ELISA实验 Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,gdnf ELISA KIT
BTN131179 核酸稀释液,测OD专用 Diluent for NA OD Detection 核酸稀释液,测OD
9048-46-8 Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ(不含脂肪酸)
ARB12505 大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA检测服务 Rat haptoglobin,hpt/hp ELISA KIT
ARB12572 大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)含量分析 Rat brain derived neurotrophic facor,bdnf ELISA KIT
BL1253 1kb plus DNA Ladder
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·FITC-羊抗兔IgG
编号:XH102
规格:0.5ml/5ml
荧光素标记抗体,是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病毒学及自身抗体的临床免疫诊断之中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。
我们生产的荧光素标记羊抗兔IgG是将异硫*酸荧光素(FITC,来源于SIGMA),经过常规方法标记在抗体羊抗兔IgG(来源于我公司自己纯化的抗体)分子上,经过过柱,透析,定量,加入稳定剂等,制成FITC-羊抗兔IgG。
储存条件:-20℃冻存。
浓度:抗体2mg/ml。
应用范围:FITC-羊抗兔IgG主要用于一抗来源于人多抗(单抗也行)的后续实验。如免疫组化。
主要性能:
FITC为Sigma异构体I,ZD吸收峰为495nm,ZD发射峰为525nm。
工作液用0.01mol/L pH7.4PBS作1:5~1:20稀释使用,稀释过的抗体尽快用完,不要冻融。
·TMB单组分显色液
编号:XH083
规格:100ml/500ml
产品介绍:
TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),经典的方法是采用AB液分开配制,使用前再混合的方法,但我们产的单组分TMB显色液,采用独特的配方,一种组分就可以显色,并且长期存放稳定。如果客户以前没听说过或者不太相信此产品,可以在离心管中直接取100ul稀释过的酶标二抗,再加入100ul此显色液,混合后试一下。
本产品特点:
即用型:无需混合,方便快捷,减少误差
灵敏度高:不低于A.B液
稳定性好:+2-8°C保存,有效期不低于24个月;显色终止后读数稳定
背景低:底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04
质量可靠:产品批间差小
外观:本试剂一般情况下为无色,有时略显浅蓝色或浅黄色
使用方法:
用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗),倒出适量的单组分TMB显色液,待达到室温后即可使用。
加液:加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要,在室温(15-25°C)或37°C下温育10-30分钟。
终止:加等体积的1M 盐*(代"酸")或硫*(代"酸")溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数:终止反应后30分钟内在450nm处读数。
注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
我公司强烈推荐细胞及免疫学系列产品,热情期待您的咨询选购北京现货SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)品Pai。
温馨提示:不可用于临床ZL。