Z138人套细胞系淋巴瘤细胞介绍: 英文名称 | Z138 |
中文名称 | 人套细胞系淋巴瘤细胞 |
动物种属 | 人 |
规格 | 贴壁细胞:T25细胞培养瓶;悬浮细胞:15mL离心管 |
运输方式 | 复苏细胞常温运输,冻存细胞干冰运输 |
细胞类型 | 科研 |
Z138人套细胞系淋巴瘤细胞传代培养的方法
传代前准备--胰蛋白酶消化--吹打分散细胞--分装稀释细胞--继续培养
1) 将培养瓶内旧的培养液弃掉, 然后用D-Hanks液洗两次,(一定要洗干净,以免影响胰酶的消化作用)。
2) 加入0.25%胰酶-EDTA消化,25cm培养瓶加0.4ml, 37度消化5min,镜下看到细胞变圆,间隙增大。
3)立即加含10%FCS的培养液终止消化,用细胞刮刀轻刮,注意,这时候用吸管吹不下来,但是刮刀却很容易刮下来,而且对细胞的损伤极小。
4)离心,弃上清,加新的培养液(10%FCS),小心吹匀,分装入新的培养瓶。
传代
Z138人套细胞系淋巴瘤细胞培养注意事项:
1、不要轻易改变培养液,我曾经把MEM换成1640后,细胞传几代后莫名其妙死亡。
2、如果想节省消化液,上面第2步可换成3-5mlDPBS洗,主要是去除培养瓶里会影响消化液作用的成分。
3、自配消化液一定要调PH(=7.8-8)值,并且注意分装,-20度保存,避免反复冻融,用前37度预热,消化较好较快。
4.严格的无菌操作
5.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。
Z138人套细胞系淋巴瘤细胞附:EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红4ml,加入蒸馏水定容至1000ml。10磅20min高压灭菌,使用时调节PH值到7.4。注意EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要彻底清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。
售后服务告知书一、 收到细胞处理方法1、 收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置若干小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100×,200×各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。
2、 收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费重发一次细胞。
3、 收到细胞后,可将培养瓶里多余的培养基收集放置于4℃备用。刚开始培养时,建议用瓶内的培养基,可补加2%的血清,待细胞状态恢复后,培养液一半用瓶内的,一半用客户自备的,使细胞逐渐适应培养条件,以免因不适应而造成生长状态不佳。
二、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?1、 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2、 细胞污染问题,请在收到产品24小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
3、 常温发货的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
4、 干冰冻存发货的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
5、 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时或常温发货的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
6、 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果(用台盼蓝染色法鉴定细胞活力),核实后予重发;
7、 视具体情况而定。
三、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?1、 客户操作造成细胞污染,不重发;
2、 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
3、 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4、 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发;
5、 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6、 细胞收到2天内,未告知的,不重发;
7、 视具体情况而定。
四、其他服务政策1、 细胞出现问题后,未能及时反馈并提交细胞质量问题反馈表的,不能免费重发,如需重发,客户需支付购买价7.0折的费用。
2、 如客户收到细胞8-30天之内,因处理不当造成细胞死亡或污染,我公司可以7.0折优惠价重新提供该细胞株。