名称:SDS-PAGE蛋白电泳套装
编号:XH061
品Pai:百奥莱博
规格:50T
产地:国产|进口
产品简介
本公司提供的蛋白电泳套装包含凝胶制备,蛋白上样缓冲液及蛋白电泳上样缓冲液。
本公司生产的SDS-PAGE蛋白电泳套装是按照经典方法配制而成。本套装根据电泳体系的大小,可进行约50次左右。
使用说明:
一,前期工作:蛋白提取及定量。
二,蛋白上样液的制备:蛋白上样缓冲液解冻,轻轻混匀,按4体积蛋白样品加入一体积的5×蛋白上样缓冲液,混匀,沸水中水浴5分钟。
三,电泳液的配制:将一包电泳液干粉全部倒入1L-2L的烧柄中,加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液,用前再稀释5倍或者先配成1L成为10×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液,用前再稀释10倍。
四,取10-15支1.5ml离心管,将过硫酸铵干粉分装成100mg/支,标记好备用。
五,凝胶制备:
1, 取一支称好的100mg过硫酸铵干粉,加入1ml蒸馏水,混匀,此配好的10%过硫酸铵溶液2-8度可保存一周,一周后请用新的。洗干净电泳玻璃板,夹好。
2, 根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。
注意:
1,TEMED和10%过硫酸铵后加,在加入前需混匀前面所加试剂。10%过硫酸铵在4℃有效期为一周,TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固,如温度过低,可放37℃温箱凝固。灌完分离胶后,轻轻的加1ml ddH2O封上层,胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前,先倾去水层,再用吸纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后,放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,可防加样孔变形。
2,配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同,可自行调整,主要是调整30%丙烯酰胺的量(需要浓度×总体积/30%),后用水补足总体积。
六,上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等溴酚兰电泳到合适的位置,结束电泳,染色或者进行下一步实验。
关键词:SDS-PAGE蛋白电泳套装,XH061,百奥莱博
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