XH109 SABC(小鼠IgG)-FITC

SABC(小鼠IgG)-FITC免疫组化试剂盒价格

规格：100T

编号：XH109

品Pai：百奥莱博

产地：国产|进口

试剂盒组成:

1， 封闭液：10ml，5%BSA

2， 生物素化羊抗小鼠：浓缩液100ul。

3， SABC-FITC:浓缩液100ul。

4， 稀释液：30ml。

5， 抗荧光衰减封片剂



试剂盒简介：

本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验. FITC显色。

SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。

自备试剂：

1．粘片剂多聚赖氨酸

2． 0.01 M PBS（pH7.2-7.4)

3． 0.01M柠檬酸钠缓冲液

4、抗荧光衰减封片剂

实验步骤:

以石蜡切片热修复为例

1. 切片常规脱蜡至水。

2．热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2次。

3．滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。

4．用稀释液将一抗（如小鼠抗IL-10）按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）

5．根据使用量,用稀释液将生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗小鼠IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗小鼠IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。

6．根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液，混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃，30分钟(避光)。PBS（pH7.2-7.4）洗5分钟×4次。

7．滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。



注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后封片观察。



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SABC(小鼠IgG)-FITC免疫组化试剂盒价格关键词：SABC,XH109,小鼠IgG





·ECL超敏发光液

编号：XH057

规格：25ml/100ml/250ml

保存条件：2－8度保存有效期12个月



产品简介

ECL化学发光液在HRP的催化下发生化学反应而发光，可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。使用照相技术（X-光胶片曝光）或者其他成像方法（如荧光或化学发光成像仪）进行检测。

我们的ECL超敏发光液是在普通的化学发光液基础之让改进而来，相对于普通发光液来说，灵敏度更高，检测下限更低，可达到pg级别的抗原，并且一抗和二抗的稀释度更高。

本产品在5分钟后光强达到Z大，在30分钟时光强还能维持80%（以5分钟时光强为基础）。终发光时长可达一小时。

操作步骤

1.在二抗孵育完毕后，将发光液从冰箱取出到室温平衡。将印迹膜充分洗涤。

2.根据需要量，将ECL超敏发光液A和ECL超敏发光液B按照1：1的比例等体积混合，配制为化学发光检测底物工作液（例如：一张8cm×6cm的膜使用2ml工作液，为节省试剂，初次实验可用洗涤缓冲液测试，以少的液体盖住整个膜的表面）。

3.弃去洗涤缓冲液，转移到暗室或者避光盒里操作，将发光底物工作液滴加在印迹膜上，确保工作液覆盖整张膜，室温孵育5分钟。

4.去掉多余发光底物工作液，将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间，此过程应小心完成，避免膜与膜之间产生气泡。

5.在暗室内进行X-光胶片曝光，或将膜放置到荧光、化学发光成像仪内，按照仪器说明书进行检测。

6.因本产品发光发光超度高，发光时间长，所以为得到理想的结果，可多次曝光（不同时长）以得到理想的结果。

注意事项

1.为获得实验结果，请务必优化实验条件，包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择，并且发光液请现用现配。

2.建议在封闭缓冲液及所有抗体稀释液中加入高质量的吐温-20（终浓度为0.05%），以减少非特异性结合。

3.由于叠氮钠是HRPYZ剂，在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂。

4.免疫印迹实验进行全过程中，请确保印迹膜始终处于湿润状态，避免干燥。

5.在与膜发生接触过程中请佩戴手套或者使用洁净镊子，避免蛋白污染。

6.实验过程中，请使用洁净器材。保证非金属设备没有明显划痕，金属设备表面无锈。锈可能导致膜上带有污点或者高背景。

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