BL21-Gold (DE3)感受态细胞基本信息
出品公司: | ATCC |
菌株类型: | E.coli |
培养基: | LB培养基 |
生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: | |
抗性: | 四环素 |
质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
应用: | 可以同时用作蛋白表达菌株和质粒克隆菌株 |
订购信息
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
AT1008 | BL21-Gold (DE3) | 500ul甘油菌 | ¥1000.00 |
菌株特点
BL21-Gold(DE3)是BL21系列细胞的升级版,提升了转化效率并且能够产生高质量的小提DNA。
BL21-Gold(DE3)是利用T7 RNA聚合酶启动进行蛋白表达的载体的GX表达菌株。本宿主菌来源于E.coli B,缺乏Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,能够有效防止目标蛋白降解。
BL21-Gold(DE3)感受态细胞具有Hte表型,该表型增加了细胞的质粒转染效率。另外,菌株内的endonuclease I (endA)编码基因被失活了,而该蛋白酶(endA)能够在大部分的质粒小提时,快速降解质粒DNA。这两个菌株明显特征,使得该菌株能够直接用来扩增克隆蛋白表达构建质粒。
由于在未使用IPTG进行诱导表达时,宿主菌内仍然有少量T7 聚合酶合成,这能够导致少量的目的蛋白合成。如果目的蛋白是毒性蛋白的话,会YZ细菌生长,甚至导致细菌死亡。所以本菌株不适合表达对细菌有毒性或生长YZ的蛋白。
菌种培养及打管说明:1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项:l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
温馨提示:不可用于临床ZL。