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名称:磷酸化FoxO1(Thr24位点)/FoxO3a(Thr32位点) 抗体品Pai
编号:YT775
品Pai:百奥莱博
规格:>20次
英文名:anti-Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32) antibody
本抗体是用人工合成的含磷酸化Thr28的一段人FoxO4多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体可以检测内源性的Thr24被磷酸化的FoxO1或Thr32位磷酸化的FoxO3a,也可检测内源性的Thr28被磷酸化的FoxO4。不识别其它位点磷酸化的FoxO1。
转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和
FoxO3a,和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似,介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后,可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而YZ肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期YZ蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用,而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化,导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中,从而YZ其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。
FoxO1,也称FoxO1a、FKH1或FKHR,属于Forkhead蛋白家族中的O亚家族(O subclass),对于机体正常生长发育是必需的。研究表明,FoxO1参与多种多样的细胞功能,包括长寿、代谢、繁殖、胰岛素调节、细胞周期、凋亡和应激反应等。FoxO1参与通过PI3K信号通路的生长信号应答。FoxO1三个保守的serine/threonine位点被Akt磷酸化后,可导致其从细胞核向细胞浆转运和基因转录活性的YZ。
产品组份:
Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人工合成的含磷酸化Thr28的一段人FoxO4多肽
宿主:兔
用途:WB,IP
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
同种型:IgG
分子量:78~82kD,95kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:50)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·Cy3抗山羊免疫荧光染色试剂盒
编号:YT101
英文名称:Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Donkey Anti-Goat IgG
规格:>300次
本试剂盒含有Cy3标记的驴抗山羊IgG(H+L)抗体,可以用于检测山羊来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的红色。Cy3是近年新开发的一种红色荧光探针。它比绝大部分其它的红色荧光探针更加明亮,更加不容易淬灭,而且背景更低。Cy3的吸收峰550nm、发射峰570nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
试剂盒组份:
抗山羊Cy3————————————0.03ml
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml
注意事项:
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
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