人磷酸化AKT蛋白(p-AKT)ELISA试剂盒说明书 详细介绍:
代理国外IBL、R&D等各品Pai原装进口试剂盒和自主研发的ELISA试剂盒。各种标本、种属、具体指标齐全。
实验方法:
酶联免疫法/酶免法(ELISA)凡购买目录本公司ELISA检测试剂盒可提供代测服务。
ELISA实验原理: 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP-标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成终的黄色。 颜色的深浅和样品中的目标蛋白呈正相关。用酶标仪在(450nm)波长下测定测定O.D.值(吸光度),计算样品浓度。
保存:2-8℃
试剂盒内容及其配制
详见说明书
样品类型(SAMPLE TYPES):
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清
或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
操作注意事项
样品采集:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,
将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
人磷酸化AKT蛋白(p-AKT)ELISA试剂盒说明书 免费代测操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
灵敏度、检测范围、参考值,具体请查看说明书.
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科研ELISA检测试剂盒.提供实验代测服务.
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