RNA保存液(长期保存RNA) RNA纯化
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
英文名:RNA long-term preservation solution
编号:ALH062
规格:2ml
本品可以允许RNA在4℃过夜或-20℃保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。
用RNA长期保存液溶解RNA沉淀:
1. 对固体RNA 沉淀,每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA 长期保存液,反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA 沉淀难以溶解,可反复吹打混匀后50℃加热10-15 分钟。先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA沉淀,然后按液态RNA 操作。
2. 对液态RNA 溶液,每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液,混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。
3. 测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。
4. 将溶解的RNA 样品储存于-20℃或者-70 ºC。
从RNA长期保存液中沉淀RNA:
1. 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇,混匀。如果溶液体积过小操作不便,可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于
0.25μg/μl,可加入5M NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀,然后再加入4 倍体积乙醇。
2. 室温放置5 分钟。
3. 12000rpm,5 min。弃上清。风干,溶解。
4. 重新沉淀的RNA 溶解后可用于RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。
直接使用RNA长期保存液中的RNA:
直接吸取RNA长期保存液中的RNA,进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时,后上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。
附:甲醛变性电泳样品准备: 临用前,混合水(87μl),甲醛(81μl), 50%甘油/含0.25 mg/ml 溴芬兰(48μl) 和20X MOPS (24μl). 将上述混合液和RNA 长期保存液中的RNA 样品等体积混合,55℃温育10 分钟,按照标准的甲醛变性电泳过程上样。
注意事项:
1. RNA 长期保存液可能YZ逆转录酶活性,做RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg/μl。
储存条件:4℃
本制品别名:RNA长期保存液|防止RNA降解剂|长期RNA保存液|RNA防降剂
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·一链cDNAGX合成试剂盒
编号:ALH262
英文名称:First Strand cDNA Synthesis Kit
规格:20μl×50次
本试剂盒以RNA为模板,用RTase/RNaseYZ剂Mix、5×RT Reaction MixGX合成一链cDNA,操作简单。制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本试剂盒适用于一链cDNA合成。可用于高拷贝、低拷贝基因的检测。合成cDNA片段长度Z高可达12kb。
试剂盒组分(50次):
RTase/RNase Inhibitor Mix-———————50μl
5×RT Reaction Mix———————————200μl
Oligo(dT)18(0.5μgμl)—————————50μl
Random primer (N6)———————————50μl
RNase free H2O—————————————1ml
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 可选步骤(一般不需要):如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
4. RTase/RNase Inhibitor Mix非常粘稠,溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请点甩离心后使用,并且避免吸头外壁沾附损失。可以每次按照0.8μl使用,也不影响使用效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
本制品别名:cDNA一链合成试剂盒|GXRT-PCR试剂盒
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