超敏聚合酶免疫化学检测试剂盒（鼠、兔通用）

超敏聚合酶免疫化学检测试剂盒（Goat）
 

产品编号	产品名称	包装
WH1084	超敏聚合酶免疫化学检测试剂盒（Goat）	50-100张

产品简介：
超敏聚合酶免疫化学检测试剂盒（Goat）是高敏感性试剂盒。用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上，形成超大分子抗体-酶聚合物，替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力，同时有很强的组织细胞渗透力，特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单，快速，高敏感，低背景等特点。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
WH1084-1	封闭液（5%BSA）	3ml
WH1084-2	内源性过氧化物酶阻断剂（3%H2O2）	3ml
WH1084-3	聚合HRP标记抗羊IgG	3ml
—	说明书	1份

保存： 4℃可保存一年，应避免冷冻。
使用方法:
A.石蜡切片染色程序:
1.载玻片防脱片剂处理:可选择APES 或Poly-Lysine。捞片后置烤箱58-60 ℃30-60 分以使切片紧密粘附。
2.切片脱蜡至水。
3.3%H2O2,室温10 分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗2 分钟×3 次。
4.根据抗原抗体情况，必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。
5.滴加封闭液,室温 10分钟。甩去多余液体, 不洗。
6.滴加适当稀释的一抗（羊 IgG），20-37 ℃ 1~2 小时或 4℃过夜。0.01M PBS 洗 2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
7.滴加聚合 HRP 标记抗羊 IgG， 37℃孵育 30 分钟，PBS 或 TBS 冲洗，2 分钟×3 次。
8.DAB 显色:按 100ml 0.02M PBS 或 TBS 中加入ZZ浓度为 25-50mgDAB,0.03%的 H2O2。或使用DAB 显色试剂盒。取1ml 蒸馏水,加试剂盒中A,B,C 试剂各1 滴,混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间，一般5-30 分钟。蒸馏水洗涤。
9． 苏木素轻度复染、脱水,透明,封片、观察。
B.血涂片，细胞和冰冻切片染色程序
1.载玻片经防脱片剂处理（Poly-L-Lysine）。抗凝血经分层离心后涂片；培养细胞也可涂片或贴片生长；冰冻切片室温风扇吹干。
2.固定方案用4%多聚甲醛或丙酮固定10-20 分钟。
3.30%H2O2 1 份+纯甲醇50 份混合,室温浸泡30 分钟，以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。
其余步骤和石蜡切片5-9 步相同。
如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复，方法和石蜡切片4-10 步相同。