BeWo人胎盘绒膜癌细胞冻存时使用的DMEM培养基,复苏时使用MEM培养基,第二天发现复苏不成功,细胞没有贴壁,我又重新离心之后加入DMEM培养基,请问大神对细胞有影响吗??之后是否可以贴壁生长?
资源名称 BeWo
种属 人胎盘绒膜癌细胞
形态 上皮样
培养方法
培养基 F12:Ham'sF12NutrientMixture10%FBS
传代方法 1:3传代;3~4天换液1次。
生长特性 贴壁生长
存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
这两个培养基成分差距不大,大部分细胞换用应该没什么影响。BeWo人胎盘绒膜癌细胞复苏不贴壁的话可能是:1.冻存细胞有问题,比如冻存细胞状态不是很好,冻存降温过快等;2.复苏细胞有问题,比如融化速度过慢,离心时间和转速有问题;3.细胞本身特性,有些细胞贴壁很慢,过夜不一定会都贴壁,这种情况不动是的,再离心的话细胞贴壁只会更慢。
BeWo人胎盘绒膜癌细胞爬片的步骤:
1 什么是细胞爬片?其用途是什么?
2 细胞爬片的步骤是怎样的?
3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器?
细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁BeWo人胎盘绒膜癌细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上,细胞贴得更牢固。
细胞爬片:将片子放在细胞培养板(均已经消毒)中,加入一定数量的细胞悬液,让它生长24小时。待它贴壁后,细胞爬片就制作好了。
需要的器材:多聚赖安酸、合适大小的盖玻片(根据细胞培养板孔大小而定)、细胞培养板、培养基。
A3 人T淋巴细胞白血病细胞
A7r5 大鼠胸主动脉平滑肌细胞
A875 人黑色素瘤细胞
ACTK1 非洲爪蟾肾细胞
AGS 人胃腺癌细胞
Ana-1 小鼠巨噬细胞
AtT-20 小鼠垂体瘤细胞
B16-F10 小鼠黑色素瘤细胞
BABL/3T3 BABL/C小鼠胚胎成纤维细胞
BABL/C1 BABL/C1小鼠14天胚胎成纤维细胞
BALL-1 人B淋巴细胞急性白血病细胞
BHK 叙利亚仓鼠肾细胞2n=42
BT-325[BT325] 人脑多形性胶质母细胞瘤细胞
C127 小鼠乳腺癌细胞
C2C12 小鼠成肌细胞
C8166-CD4 人T细胞性白血病细胞
CAM191 EBV-转化人淋巴细胞
Caski 人子宫腺癌细胞
CATH.a 小鼠神经细胞
CatL2 家猫肺成纤维细胞
CatS2 家猫皮肤成纤维细胞