A-375 A-375人恶性黑色素瘤细胞

 

A-375人恶性黑色素瘤细胞冻存时使用的DMEM培养基，复苏时使用MEM培养基，第二天发现复苏不成功，细胞没有贴壁，我又重新离心之后加入DMEM培养基，请问大神对细胞有影响吗？？之后是否可以贴壁生长？

资源名称 A-375[A375]

种属 人恶性黑色素瘤细胞

形态 上皮样

培养方法

培养基 DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；1mM丙酮酸钠+4mML-Glutamine

传代方法 1:3~1:8传代；2~3天换液1次。

生长特性 贴壁生长

存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

这两个培养基成分差距不大，大部分细胞换用应该没什么影响。A-375人恶性黑色素瘤细胞复苏不贴壁的话可能是：1.冻存细胞有问题，比如冻存细胞状态不是很好，冻存降温过快等；2.复苏细胞有问题，比如融化速度过慢，离心时间和转速有问题；3.细胞本身特性，有些细胞贴壁很慢，过夜不一定会都贴壁，这种情况不动是的，再离心的话细胞贴壁只会更慢。

A-375人恶性黑色素瘤细胞爬片的步骤：

1 什么是细胞爬片？其用途是什么？

2 细胞爬片的步骤是怎样的？

3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器？

细胞爬片就是让细胞（贴壁细胞）在片子（盖玻片）上生长。主要用来做免疫细胞化学啊，原位杂交等吧。在做这些实验时，制作标本有两种，一是离心做细胞涂片，二是细胞爬片。利用贴壁A-375人恶性黑色素瘤细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点，让它在盖玻片上生长，可以使制作的细胞片子更牢固，在后面的洗涤过程中，不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上，细胞贴得更牢固。

细胞爬片：将片子放在细胞培养板（均已经消毒）中，加入一定数量的细胞悬液，让它生长24小时。待它贴壁后，细胞爬片就制作好了。

需要的器材：多聚赖安酸、合适大小的盖玻片（根据细胞培养板孔大小而定）、细胞培养板、培养基。

拉表拉表拉表拉表拉表

BEAS-2B 人支气管上皮样细胞

BFR-K1 大额牛肾细胞

BFR-L1 大额牛肺细胞

BFR-S3 大额牛皮肤细胞

BIN-S1 瘤牛皮肤细胞

BJ 人皮肤成纤维细胞

BMU-S1 耗牛皮肤细胞

BOS-1 大额牛皮肤成纤维样细胞

BOS-2 大额牛皮肤成纤维样细胞

BOS-3 婆罗门牛皮肤成纤维样细胞

BOS-4 婆罗门牛皮肤成纤维样细胞

BTA-S2 黄牛皮肤细胞

C1.Ly1+2-/9 小鼠T淋巴细胞

C6/36 幼蚊细胞

CATK1 家猫肾细胞

CCC-Ca761-03 小鼠乳腺癌细胞

CCC-HB-2 人胚胎膀胱组织来源细胞

CCC-HBE-2 人胚胎气管组织来源细胞