ALH075 质粒小量制备试剂盒

北京质粒小量制备试剂盒报价

品Pai：百奥莱博

规格：100次|200次

产地：国产|进口

编号：ALH075

英文名：Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)

本试剂盒适用于小规模质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。



试剂盒组份(100次)：

RNaseA(10mg/ml)————————250μl

溶液P1—————————————25ml

溶液P2—————————————25ml

溶液P3—————————————35ml

漂洗液WB————————————25ml

洗脱缓冲液EB——————————15ml

吸附柱和收集管(2ml)———————100套



试剂盒特点：

1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好， 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。



注意事项

1. 本试剂盒适用菌株为XL-1 Blue和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株，核酸酶含量丰富，应购买本公司生产的高纯度质粒小量快速提取试剂盒。

2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

3. 溶液P3中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒，建议接种单菌落于1.5～4.5ml加合适抗生素的LB培养基， 过夜培养14～16个小时，可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应适当加大菌体使用量，使用5～10ml过夜培养物，同时按比例增加P1、P2、P3的用量，其它步骤相同。

5. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。

6. 质粒DNA确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。

7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。



储存条件：室温，有效期12个月。



本品别名：柱式质粒小量提取试剂盒|小量质粒制备试剂盒|小量质粒提取试剂盒|质粒小量制备试剂盒



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·细胞组织DNA/RNA/蛋白分离纯化提取试剂盒

编号：ALH068

英文名称：Tissue Cells DNA/RNA/microRNA/Protein Extraction & Isolation Kit

规格：50次

本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和包括miRNA的总RNA和Protein(如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液，还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取，富集miRNA。)。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶，然后裂解混合物RNA/miRNA/DNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱，基因组DNA被吸附而miRNA/RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的miRNA/RNA用乙醇调节结合条件后，miRNA/RNA在高离序盐状态下选择性吸附于miRNA/RNA吸附柱上，再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯miRNA/RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无苯酚、氯*(代"仿")DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的miRNA/RNA/基因组DNA纯度高，互不干扰。得到的miRNA/RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。



产品组分：

裂解液RLT Plus————50ml

Wash Solution 1————12ml

Wash Solution 2/3————10ml

RNase-free H2O—————10ml

YZ物去除液————25ml

漂洗液————————15ml

缓冲液————————60ml

洗脱缓冲液——————10ml

基因组DNA吸附柱和收集管————50套

RNA吸附柱和收集管————50套



产品特点：

1. 完全不使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

2. 快速，简捷，单个样品miRNA/RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。

3. 独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留，一般情况下得到的miRNA/RNA不需要DNase消化可直接 用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。

4. 多次柱漂洗确保miRNA/RNA/基因组DNA高纯度，可直接用于下游各种实验。



注意事项：

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2. 样品处理量不要超过基因组吸附柱和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超过3×106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3～4×106，组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。

3. 裂解液RLT Plus 、YZ物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4. 该试剂盒如需要用于植物样品尤其是多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/miRNA/RNA提取，请咨询技术人员，可能需要用到其它试剂。

5. 如购买额外miRNA吸附柱子和配套溶液，还可以将同一个样品的总RNA和miRNA分离并提取，富集miRNA。请咨询我们。

6. 关于DNA 的微量残留：

一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到无残留）， 本试剂盒，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 分离清除技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：

1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。

2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。



储存条件：室温，有效期一年。

我公司生产供应销售的DNA纯化正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购北京质粒小量制备试剂盒报价。