规格:1ml|5ml
编号:ALH609
品Pai:百奥莱博
英文名:Fast&HiFi PCR MasterMix
本品包含快速高保真DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。所含聚合酶来自于基因工程改造的pfu,大大提高了扩增速度、保真性和产量。本产品是非长片段超保真快速扩增的产品。本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
产品特点:
1. 扩增速度快:延伸速度可以达到2~4kb/min,是pfu的4~8倍。
2. 扩增产量高:一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-
3. 优异保真性:保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变落。
4. 扩增长度指标和pfu一致,可以完全替代pfu进行快速高保真扩增,但不建议用于pfu无法扩增的长片段。以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过3kb左右的产物,以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过6kb左右的产物。
注意事项
1.本系统扩增速度快,质粒和简单基因组等简单模版可采用15~20秒/kb,复杂模版如人类基因组可以采用30~45秒/kb。
2.对于GC含量很高的模版,预变性和变性温度可以提高到98℃,本品聚合酶耐热性强,98℃对聚合酶活性无影响。
3.如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%~8%,按照1%梯度增加摸索浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1~1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。
储存条件:-20℃,有效期24个月。
本品别名:高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)|2×PCR MasterMix
我公司的高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料),性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
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·植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)
编号:ALH036
英文名称:Plant RNA Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取植物组织细胞总RNA,是在无苯酚、氯*(代"仿")RNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,基因组DNA清除柱子同时吸附清除残留的DNA, 然后RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,世界上简单快速的试剂盒。
3.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
4.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
5.适应性极其广泛,可以提取包括棉花、松针、冬青树叶、葡萄叶片、等100多种国内外试剂盒提取失败的样品。详细样品列表请参考公司主页产品介绍。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
组份 | 20次 | 50次 | 裂解液RLT | 20ml | 50ml | 裂解液CLB | 8ml | 8ml | 裂解液RLT Plus | 10ml | 25ml | 去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml | 漂洗液RW | 5ml | 10ml | RNase-freeH2O | 10ml | 10ml | PLANTbalb | 2ml | 5ml | 基因组DNA清除柱和收集管 | 20套 | 50套 | 吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵(可选)。
3. 样品处理量不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到无残留),本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
6. 仔细阅读补充说明2,如果裂解液CLB效果好,可以联系我们单独订购裂解液CLB,或者购买试剂盒的时候,指明将裂解液RLT换成裂解液CLB。
储存条件:室温,有效期6个月。
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