RBE/5-FU RBE/5-FU细胞

 

RBE/5-FU细胞冻存时使用的DMEM培养基，复苏时使用MEM培养基，第二天发现复苏不成功，细胞没有贴壁，我又重新离心之后加入DMEM培养基，请问大神对细胞有影响吗？？之后是否可以贴壁生长？

资源名称 RBE/5-FU

种属 人胆管癌耐药细胞株

形态 上皮样

培养方法

培养基 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生长特性 贴壁生长

这两个培养基成分差距不大，大部分细胞换用应该没什么影响。RBE/5-FU细胞复苏不贴壁的话可能是：1.冻存细胞有问题，比如冻存细胞状态不是很好，冻存降温过快等；2.复苏细胞有问题，比如融化速度过慢，离心时间和转速有问题；3.细胞本身特性，有些细胞贴壁很慢，过夜不一定会都贴壁，这种情况不动是的，再离心的话细胞贴壁只会更慢。

RBE/5-FU细胞爬片的步骤：

1 什么是细胞爬片？其用途是什么？

2 细胞爬片的步骤是怎样的？

3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器？

细胞爬片就是让细胞（贴壁细胞）在片子（盖玻片）上生长。主要用来做免疫细胞化学啊，原位杂交等吧。在做这些实验时，制作标本有两种，一是离心做细胞涂片，二是细胞爬片。利用贴壁RBE/5-FU细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点，让它在盖玻片上生长，可以使制作的细胞片子更牢固，在后面的洗涤过程中，不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上，细胞贴得更牢固。

细胞爬片：将片子放在细胞培养板（均已经消毒）中，加入一定数量的细胞悬液，让它生长24小时。待它贴壁后，细胞爬片就制作好了。

需要的器材：多聚赖安酸、合适大小的盖玻片（根据细胞培养板孔大小而定）、细胞培养板、培养基。

 

形态特征：贴壁；上皮细胞样

生长特性：贴壁

培养条件：RPMI-1640+10% FBS

传代方法：1:3-1:8传代，每周换液2次。

背景：这株细胞建于1994年三月，这株肺腺癌在EGFR酪氨酸激酶区域有一个获得性突变（E746-A750缺失）。患者在25岁到26岁时每个月抽1包烟。在诊断前12年不再抽烟。

细胞简称：HCT116(HCT-116)细胞

细胞名称：HCT116(HCT-116)；人结肠癌细胞

组织来源：结直肠癌

规    格：T25培养瓶，1×106cells

形态特征：贴壁；上皮细胞样

生长特性：贴壁

培养条件：MCCOY,S +10% FBS

传代方法：1:3-1:8传代，每周换液2次。

背景：HCT 116是1979年BRATTAIN M等从患结肠癌的男性病人中分离建立的3株恶性细胞之一；产生CEA、角蛋白。在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT 116在无胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮样的肿瘤。

细胞简称：SPC-A-1(SPC-A1)细胞