Wistar大鼠骨髓MSC细胞 Wistar大鼠骨髓MSC细胞

 

Wistar大鼠骨髓MSC细胞冻存时使用的DMEM培养基，复苏时使用MEM培养基，第二天发现复苏不成功，细胞没有贴壁，我又重新离心之后加入DMEM培养基，请问大神对细胞有影响吗？？之后是否可以贴壁生长？

资源名称 Wistar大鼠骨髓MSC细胞

种属 Wistar大鼠骨髓间充质干细胞（干细胞库保藏）

类型 大鼠骨髓

形态 梭形、纺锤形和多角形

培养方法

培养基 MSC完全培养基成分（100 ml）： α-MEM medium with GlutaMAXTM-I (Invitrogen 32571) 89 ml FBS (Biochrom, S4115) 10 ml Pen Strep (Invitrogen 15104) 1 ml 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。

这两个培养基成分差距不大，大部分细胞换用应该没什么影响。Wistar大鼠骨髓MSC细胞复苏不贴壁的话可能是：1.冻存细胞有问题，比如冻存细胞状态不是很好，冻存降温过快等；2.复苏细胞有问题，比如融化速度过慢，离心时间和转速有问题；3.细胞本身特性，有些细胞贴壁很慢，过夜不一定会都贴壁，这种情况不动是的，再离心的话细胞贴壁只会更慢。

Wistar大鼠骨髓MSC细胞爬片的步骤：

1 什么是细胞爬片？其用途是什么？

2 细胞爬片的步骤是怎样的？

3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器？

细胞爬片就是让细胞（贴壁细胞）在片子（盖玻片）上生长。主要用来做免疫细胞化学啊，原位杂交等吧。在做这些实验时，制作标本有两种，一是离心做细胞涂片，二是细胞爬片。利用贴壁Wistar大鼠骨髓MSC细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点，让它在盖玻片上生长，可以使制作的细胞片子更牢固，在后面的洗涤过程中，不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上，细胞贴得更牢固。

细胞爬片：将片子放在细胞培养板（均已经消毒）中，加入一定数量的细胞悬液，让它生长24小时。待它贴壁后，细胞爬片就制作好了。

需要的器材：多聚赖安酸、合适大小的盖玻片（根据细胞培养板孔大小而定）、细胞培养板、培养基。

 

BC-022（人乳腺癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

BC-021（人乳腺癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

HOS（人骨肉瘤细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

HLF-a（人肺细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

BC-020（人乳腺癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

HKC（人肾小管上皮细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

BC-019（人乳腺癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

HHCC（人肝癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

HGF-1（人牙龈成纤维细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

BC-009（人乳腺癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

HFT-8810（人胎儿胸腺细胞株） 5×10?cells/T25培养瓶

HFSF（人胚胎眼巩膜成纤维细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

AM （人腺样囊性癌细胞(高转移)） 5×10?cells/T25培养瓶

hFOB?1.19（人SV40转染成骨细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

HFF-1（人包皮成纤维细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

Hep B1.2（人肝癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

A875（人黑色素瘤细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

BxPC-3（人原位胰腺腺癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶

BT-549（人乳腺管癌细胞） 5×10?cells/T25培养瓶