WV-SPA-03细胞冻存时使用的DMEM培养基,复苏时使用MEM培养基,第二天发现复苏不成功,细胞没有贴壁,我又重新离心之后加入DMEM培养基,请问大神对细胞有影响吗??之后是否可以贴壁生长?
资源名称 WV-SPA-03
种属 小鼠7
形态 淋巴母细胞样
培养方法
培养基 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
生长特性 悬浮生长
这两个培养基成分差距不大,大部分细胞换用应该没什么影响。WV-SPA-03细胞复苏不贴壁的话可能是:1.冻存细胞有问题,比如冻存细胞状态不是很好,冻存降温过快等;2.复苏细胞有问题,比如融化速度过慢,离心时间和转速有问题;3.细胞本身特性,有些细胞贴壁很慢,过夜不一定会都贴壁,这种情况不动是的,再离心的话细胞贴壁只会更慢。
WV-SPA-03细胞爬片的步骤:
1 什么是细胞爬片?其用途是什么?
2 细胞爬片的步骤是怎样的?
3 细胞爬片需要哪些实验材料和仪器?
细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁WV-SPA-03细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上,细胞贴得更牢固。
细胞爬片:将片子放在细胞培养板(均已经消毒)中,加入一定数量的细胞悬液,让它生长24小时。待它贴壁后,细胞爬片就制作好了。
需要的器材:多聚赖安酸、合适大小的盖玻片(根据细胞培养板孔大小而定)、细胞培养板、培养基。
人男性正常龟头细胞 HS68 HS68细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人脑胶质瘤细胞 HS683 HS683细胞 DMEM+15%FBS+1%P/S 贴壁
HSC HSC 细胞 D/F12+10%FBS +1%P/S 贴壁
永生型大鼠肝储脂细胞 HSC-T6 HSC-T6细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S
人皮肤成纤维细胞 HSF HSF细胞 DMEM+15%FBS+1%P/S 贴壁
人纤维肉瘤细胞 HT-1080 HT-1080细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人膀胱癌细胞 HT-1376 HT-1376细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠海马神经元细胞 HT22 HT22细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人结肠癌细胞 HT-29 HT-29细胞 McCOY's +10%FBS+1%P/S
人眼小梁网细胞 HTMC HTMC细胞 DMEM/F-12+15%FBS+ 1%P/S
人肝癌细胞 huh-7 huh-7细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S+1%NEAA 贴壁
人肝癌细胞 huh-7.5 huh-7.5细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人肝癌细胞 huh-7.5.1 huh-7.5.1细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人胆管癌细胞 HUH28 HUH28细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁