白喉棒状杆菌PCR检测试剂盒

白喉棒状杆菌PCR检测试剂盒扩增试剂准备（PCR前准备区）

从试剂盒中取出TB PCR反应液、Taq酶及UNG，室温融化并振荡混匀后，2,000rpm离心10sec。

设所需要的PCR反应管管数为n（n=样本数+1管阴性对照+1管强阳性对照+1管临界阳性对照）。

白喉棒状杆菌PCR检测试剂盒产品特点：

准确：整个过程闭管操作，防止污染，产品（与痰液培养相比）总符合率达94.64%；

灵敏：灵敏度高，Z低检出限可达10菌/mL；

快速：从获得DNA样本到给出结果，只需2-3小时；

友好：获得核酸后，只需一步加样操作，无需PCR后处理，即可自动获得结果；

高通量：在常规荧光定量PCR仪上运行一次，可同时检测94个样本。

白喉棒状杆菌PCR检测试剂盒使用方法

1．样本处理（样本处理区）

1.1.首先对痰液样本进行目测，若样本中唾液占绝大部分，则需重新采集样本。

1.2.目测合格后，在样本中加入2～3倍体积4%的NaOH溶液，〈采希?50rpm、37℃条件下处理30min或常温下1Hr，使其充分液化（无明显固状物并且吸出时无拖丝现象即为液化完全；若液化不完全，可适当再加入少量4%的NaOH溶液直至液化完全）。

1.3.取液化后的样本900ul以及试剂盒中的阴性对照、强阳性对照和临阳性对照各500ul于1.5ml无菌离心管中，13,000rpm离心10min。

1.4.弃上清（先倒出大部分液体，再用移液器尽量吸干至无明显液滴为止），沉淀中加入1ml灭菌生理盐水，白喉棒状杆菌PCR检测试剂盒振荡悬浮（注意：按紧离心管盖后，横向按在旋涡振荡器上将沉淀振起），13,000rpm离心10min。

1.5.弃上清，用1ml灭菌生理盐水洗涤沉淀，13,000rpm离心10min。

1.6.弃上清，向沉淀中加入DNA提取液30ul，振荡混匀，2,000rpm离心5sec，放37℃温浴30min，再放入100℃水浴/干浴10min，13,000rpm离心10min，保留上清备用。（如果样本裂解产物当天不使用，请于-20℃保存。）

2.扩增试剂准备（PCR前准备区）

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