100ml 普通RIPA组织-细胞裂解液

货号：wts1240 产品名称： 普通RIPA组织-细胞裂解液 品Pai 国产 规格 100ml，别名 : 蛋白提取试剂盒 英文名称 : RIPA buffer 储存条件 : RIPA裂解液4℃保存，PMSF-20 ℃保存。至少1年 单位 : 瓶

普通RIPA裂解液(组织/细胞)产品配有一支PMSF（100mM，1.5ml）



产品简介：RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜（包括核膜）。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。



使用说明 ：



如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。



根据使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的终浓度为1mM，混匀备用 （PMSF现用现加）。



1、样品前处理：



a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。



b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 5-10×105细胞/管，然后再裂解。



c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液



(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量) 。



用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。



2、后处理：



将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。