哺乳动物双杂交试剂盒

中文名称：哺乳动物双杂交试剂盒

英文名称：Mammalian Two-Hybrid Kit

规格：20 μg

运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年

哺乳动物双杂交试剂盒产品及特点

双杂交系统是在体内检测蛋白-蛋白相互作用的极强有力方法。双杂交系统的基础

是在一些转录因子上发现的模域(modular domains): 一个DNA结合域，它可以结合

一段特异的DNA序列，和一个转录激活域，这个转录激活域与基础转录机制相作用。

一个转录激活域联合一个DNA结合域可能在TATA盒启动RNA聚合酶II复合体的装

配，同时增强转录。在本哺乳动物双杂交系统中，DNA结合域和转录激活域分别由不

同质粒产生，融合于DNA结合域的一个蛋白质(“X”)与融合于转录激活域的第二个

蛋白质(“Y”)相互作用时，DNA结合域就与转录激活域紧密关联。在这个系统中，

蛋白X与Y的相互作用导致报告基因的转录。蛋白相互作用正对照反应的概略图如下：

如图：在正对照反应中，pBIND-Id和pACT-MyoD对照载体与pG5 luc载体一起共

同转染哺乳动物细胞。载体pG5luc的萤火虫萤光素酶基因上游含有在基本TATA盒

上游的5个GAL4结合位点。细胞温育2-3天，裂解，然后用双荧光素酶活性检测试

剂盒检测萤火虫和海肾萤光素酶。在正对照实验中，在GAL-4Id和 VP16-MyoD上

融合的蛋白Id和MyoD之间的相作用导致载体pG5 luc上的萤光素酶的高水平表达。

哺乳动物双杂交试剂盒本产品具有下列特点：

1. 用户可在所选哺乳动物细胞系中研究蛋白质的相互作用，使蛋白质更可能处于其

本来构型，从而使目的蛋白更好地保持了诸如糖基化、磷酸化和酰基化等翻译后

的修饰。

2. 易于定量：可使用天恩泽双荧光素酶活性检测试剂盒（产品编号：130595）快

捷检测萤火虫和海肾萤光素酶。

3. 快速瞬时检测：转染后两天即可得到结果，而酵母系统则需3-4天。

4. 稳定转染：pACT载体含有新霉素磷酸转移酶基因，可用于稳定转染的选择。

使用及效果