大鼠CFL1酶联免疫检测试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠CFL1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠CFL1与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠CFL1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠CFL1抗体与结合在包被抗体上的大鼠CFL1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠CFL1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠CFL1的浓度。 英文名称 | Rat CFL1 (Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit |
中文名称 | 大鼠丝切蛋白1(CFL1) 酶联免疫吸附测定试剂盒 |
货号 | H-EL-CFL1 | 种属 | Rat/大鼠 |
规格 | 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips) |
检测方法 | 双抗体夹心法 |
检测范围 | 0.156~10ng/mL | 灵敏度 | 0.094ng/mL |
(1)、将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原;(2)、加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗-体复合物;(3)、加酶标抗抗体;(4)、加入酶促反应底物,发生显色反应,显色的深浅与待测抗体的量成正比。
试剂盒性能指标:
1、物理性能:试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。
2、剂量反应曲线线性:校准品剂量反应曲线相关系数r值,大于等于0.9900。
3、精密度:批内精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在同一个板块内精度评估。批内变异系数CV%小于10%。
大鼠CFL1酶联免疫检测试剂盒批间精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在不同板块内精度评估。批间变异系数CV%小于15%。
4、灵敏度:ZD检出剂量小于******。
5、回收率:三组已知的高、中、低浓度样品,进行五次在同一个板块内回收率评估,回收率在85%-115%之间。
6、样本值:1524例健康志愿者血清和血浆样品进行测定,所有的样品测量小于****。
7、特异性:本试剂盒识别天然和重组
大鼠CFL1酶联免疫检测试剂盒,与结构类似物无交叉。
8、稳定性:2℃-8℃保存,有效期6个月。
大鼠CFL1酶联免疫检测试剂盒实验,操作的时候,加入底物,溶液变成蓝色,孵育一段时间后,加入终止液,变成黄色,测吸光值。然后,当天忘记扔板子了,第二天想到去扔的时候,所有孔都变成无色透明的了!为什么会褪色???是试剂有问题?还是因为室温太高环境影响?
没有问题的,很多公司的试剂,显色后都会褪色的。所以要求读数是在一定时间范围内去读。
也有的公司颜色会越来越深,总归第二天的都不会准的。一般是半小时内读数,比较准。
读个两到三次,选择比较接近的读数中的一板,进行计算。
elisa试剂盒中没有样品稀释液,要如何对样品进行稀释?
一般情况下,稀释液用PBS 或者生理盐水替代都是可以的。用超纯水即便不是.
问:做
大鼠CFL1酶联免疫检测试剂盒实验,但是酶标仪测OD值时未设置空白空? 结果是不是会整体偏大? 怎么补救?
答:再做一次,做上空白,再加几个没加空白的几个样品,如果数值接近,可用第二次空白。