原代T细胞专用逆转录病毒技术服务

逆转录病毒感染关键知识点
 
1）细胞准备：由于SY装体积有限，请使用96孔板准备细胞，逆转录病毒感染细胞前，请确保目的细胞状态良好、无支原体污染。逆转录病毒感染的时候细胞汇合率为40%～60%间为宜。
2）感染细胞ZJMOI的测定：MOI（感染复数）是指每个细胞感染的病毒数。
      逆转录病毒对于不同种类不同来源的细胞，其最适MOI各有差别，原则上最适MOI是感染效率较好的ZDMOI。MOI一般以3，10，30，100的比例递增进行梯度摸索，一般的细胞基础逆转录病毒感染MOI可从3为开始，即设立4个常规的MOI摸索，即3，10，30，100。
3) 助转剂polybrene的选择：实验证明，polybrene可提高逆转录病毒对大部分细胞的感染效率，但polybrene有一定的细胞毒性，不同细胞对polybrene的敏感度不同，polybrene最常用的工作浓度为5～8μg/ml。
4）MOI对应病毒体积的换算（非常重要）
感染时细胞数（一般以传代计数细胞数×2计算）×MOI=病毒个数；则加入的病毒体积数=病毒个数/病毒滴度。