RGC-5细胞系；视网膜神经节细胞

RGC-5细胞系；视网膜神经节细胞    
【细胞货号】    C1104
【细胞缩写】    RGC-5细胞
【细胞名称】    RGC-5(视网膜神经节细胞)
【背景资料】    RGC-5细胞系细胞膜或者细胞内表达的物质都与RGCs相同 ，阳性表达物有Thy-1(RGCs的膜标记蛋白)、Brn-3C、Neuritin、NMDA受体、GABA-B受体、突触素、多种神经营养因子的受体(TrkA、TrkB、TrkC、p75NTR等膜生长因子的受体)、睫状神经营养因子、胶质细胞源性神经生长因子、神经营养因子-3、神经营养因子-4、神经纤维丝蛋白-106 和-200(neurofilament protein、NF-106、NF-200)。RGC-5细胞系；视网膜神经节细胞不表达的有GFAP-胶质原纤维酸性蛋白(Muller细胞标记物)、突触融合蛋白、8A-1(水平细胞标记物)、HPC-1(无长突细胞标记物)。
【细胞消化时注意把握消化时间，消化不够会导致吹打细胞时造成损伤，一般消化时间是2-3分钟，但以镜检时大部分细胞缩回球形为准，一般2次即可将细胞吹打下来，消化不够进行细胞吹打易损伤细胞。细胞系的冻存液配方：90%FBS+10%DMSO，贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养】    细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
【代次】    P4
【规格】    复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
【细胞数】    1*10（6）
【生物安全级别】    1
【生物体】    小鼠
【组织来源】    视网膜神经节细胞
【细胞形态】    成神经细胞
【细胞特性】    贴壁
【特别注意：如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养，贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养，如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决】    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【细胞检测】    细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】    RGC-5细胞系；视网膜神经节细胞详见细胞说明书
【传代方法】    建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】    详见细胞说明书
【主要文献】    请具体查阅相关发表文章
细胞培养方面注意的几点：
无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射30分钟灭菌，以70 % ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol擦拭无菌操作抬面。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域，一般勿在边缘区域操作。
小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约 45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后，将血清放入，待温度升高到56℃后计时，一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。RGC-5细胞系；视网膜神经节细胞此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清（包括不同批次）对细胞的影响。CRL-2329    HCC1500细胞系    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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