猪流行性腹泻病毒+猪传染性胃肠炎病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒品Pai

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
 

北京百奥莱博公司提供的猪流行性腹泻病毒+猪传染性胃肠炎病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒品Pai稳定性好，灵敏度高,是高品质的单克隆抗体。欢迎新老客户踊跃咨询购买

编号：DL086
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
规格：20次
【注意】接到货后请认真阅读注意事项。
【用途】用于猪流行性腹泻病毒病的检测、诊断和流行病学调查。
【试剂】
编号 数量 保存
SR-I 4mL 4℃
SR-II 10mL 4℃
SR-Ⅲ 14mL 4℃
TU-1 1.5mL 4℃
TU-2 0.8mL 4℃
TU-3 250uL -20℃
TU-4 20uL -20℃
TU-5 20uL -20℃
TU-6 20uL -20℃
TU-7 60uL -20℃
TU-8 25uL -20℃
TU-9 20uL -20℃
TU-10 20uL -20℃
T 500uL -20℃
【操作步骤】
1.RNA提取 
(1) 取疑似病料（空肠、小肠及其内容物等），用Hank’s液或PBS研磨成1：3悬液，在－20 ℃反复冻融3次，经3 000 r/min离心5 分钟，上清液再经12 000 r/min离心15分钟，上清液－70 ℃保存备用。
（2）取200uL上清液（或标准品Ｔ），移入新的1.5mL灭菌EP管中，加入200uLSR-I，漩涡振荡混合均匀，静置5min。
（3）加75uL TU-1，漩涡振荡混合均匀，10000r/min离心5 min。
（4）将上清转移到新的2 ml离心管（试剂盒内提供）中，加入300 uL 异丙醇（1%冰乙酸），上下倒置6-8次，混合均匀。
（5）将步骤4中的混合液移入制备管中，并将制备管置于同一2 ml离心管，10000 r/min离心1min。
（6）弃滤液，将制备管置回到2 ml离心管中，加500 uL SR-II，室温静置1min，10000 r/min离心1 min。
（7）弃滤液，将制备管置回到2 ml离心管中，加700 uL SR-Ⅲ，10000 r/min离心1 min。
（8）将制备管置回到2 ml离心管中，10000 r/min离心1 min。
（9） 将制备管置于洁净的1.5 ml离心管中（试剂盒内提供），在制备管膜ZY加40 uL TU-2， 室温静置1 min。10000 r/min离心1 min洗脱。洗脱液即为模板，即用或-70℃冻存备用。
2.One-Step RT- PCR加样体系
TU-3 12.5uL
TU-4 1uL
TU-5 1uL
TU-6 1uL
TU-9 1uL
TU-10 1uL
模 板 7.5uL 
3.反应程序 
第1步 50℃ 45min  
第2步
第3步 94℃预变性
94℃变性 5min
1min  
第4步 53℃退火 1min 30个循环（3～5步）
第5步 72℃延伸 1min  
第6步 72℃延伸 6min  
第7步 4℃终止 5min  
4.电泳
配制1%琼脂糖凝胶，取PCR产物5uL混合1uL TU-8，加样于凝胶孔中，同时在相邻孔加3uLTU-7，在120v 电压下，1×TAE液中电泳15分钟，在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
在约720bp位置出现扩增带，猪传染性胃肠炎检测结果为阳性，在约240bp位置出现扩增带，猪流行性腹泻检测结果为阳性。                             
1.DL2000 Marker
2.标准阳性片段

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BL0411 Lipopolysaaah aricles 脂多糖
L-苯甘氨酸乙酯盐酸盐 α-Hydroxyisobutyric acid
ARB11919 人髓系细胞触发受体-1(TREM-1)检测服务 Human triggering receptor expresses on myeloid cells-1,trem-1 ELISA KIT
BL1183 亲和层析柱30ml(2.3*10)
ARB13093 小鼠细胞周期素D3(CyclIn-D3)酶标法分析 Mouse cyclin-d3 ELISA KIT
ARB14004 鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)含量检测 Deer endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
PY08-078  绿浓菌素测定用培养基平板 9CM  10皿/盒，用于绿脓杆菌绿浓菌素的测定试验。
ARB12839 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)elisa测定使用说明书 Mouse macrophage colony-stimulating factor,m-csf ELISA KIT
BTN130567 β-Tubulin小鼠单抗 β-Tubulin Mouse Mab
十八烷基三甲基氯化铵 5-?Acetyl-?2-?bromopyridine 112-03-8
L-半胱氨酸盐酸盐无水物 GPDA 52-89-1
(3a,5b,12a)-N,N-双[3-(D-葡萄糖酰氨基)丙基]-3,12-二羟基胆甾烷-24-胺 Quinine hemisulfate salt monohydrate 86303-23-3
金属硫蛋白 Validamycin
DL-丙氨酸乙酯盐酸盐 L-Serinol 617-27-6
BL0951 胶体金标记羊抗人IgA(u链特异)抗体
ARB12223 大鼠血小板活化因子(PAF)Elisa方法检测 Rat platelet activating factor,paf ELISA KIT
87915-38-6 Dextran Blue 2000  蓝色葡聚糖 2000
ARB10223 人β促脂素(β-LPH)酶标法分析 Human β-lipotropic hormone,β-lph ELISA KIT
ARB10533 人鸟氨酸脱羧酶(ODC)elisa测定使用说明书 Human ornithine decarboxylase,odc ELISA KIT
DP421 TRNzolA+总RNA提取试剂
ARB10878 人抗脑抗体(ABAb)血清中含量检测 Human anti-brain tissue antibody,abab ELISA KIT
J0201 兔抗牛血清白蛋白抗血清 1ml/10ml
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ARB10646 人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)Elisa分析 Human vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
SJ0735 人粒细胞分离液
SJ0166 D-Raffinose 棉子糖
BTN80603 微型离心管专用研磨杵 Microtube Pestle
BL1279 1×PBS,PH7.2-7.4,0.01M,细胞培养级
ARB10377 人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)elisa检测说明书 Human mannma binding protein/mannan binding lectin,mbp/mbl ELISA KIT
PY08-063  GN增菌液 225ml  20瓶/箱，用于志贺氏菌的增菌培养亦可用于沙门氏菌增菌培养
SJ0686 200bp
阿拉西A Sunset Yellow FCF 9049-98-3
B0801 兔血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
BL1345 PH值标准液(PH9.18)
BL0963 封闭兔血清正常(原液) 10ml
鸟嘌呤 PASAM 73-40-5
SJ0541 葡聚糖凝胶C-50
ARB11323 人胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa测定使用说明书 Human glial fibrillary acidic protein,gfap ELISA KIT
ARB13880 猪白介素8(IL-8/CXCL8)Elisa方法检测 Porcine interleukin 8,IL-8 ELISA KIT
BTN60904 一站式RNA电泳套装 One-Stop RNA Electrophoresis Pack
CYB163043 羊抗大鼠IgG(全分子)-FITC
PY02-345  含铁琼脂  250克  
334-50-9 Spermidie 3HCL  亚精胺三盐酸
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·兔瘟病毒血凝YZ试验抗原、阳性血清
编号：DL033
英文名称：兔病毒性出血症血凝YZ试验抗原、阳性血清
规格：2ml×2
【兽药名称】
通用名    兔瘟血凝YZ试验抗原、阳性血清
商品名    无
英文名称    RHDV  Antigen,Positive Sera for Haemagglutination Inhibition Test
汉语拼音    Tuwen Xueningyizhi Shiyan Kangyuan Yangxingxueqing
【产品内容】
主要成分 数 量
兔瘟血凝YZ试验抗原 2ml×1
阳性血清 2ml×1
使用说明书 1份
【成分性状】
抗原含灭活的兔瘟病毒，血凝效价≥1:512；阳性血清为兔瘟高免的SPF血清，HI效价≥1:512。
【作用与用途】
用于血凝YZ试验检测兔瘟抗体。
【用法与判定】
1 血凝（HA）试验操作方法
1.1  在96孔微量板上，用加液器每孔加入PBS缓冲液25μl。 
1.2  取25μl抗原，从第1孔起，依次作2倍系列稀释至第12孔，混合，弃去25μl。 
1.3  每孔加入25μl PBS缓冲液。 
1.4  每孔加入25μl 1%鸡红细胞悬液，每块板上设稀释液和红细胞悬液对照孔。 
1.5  将微量板置振荡器上振荡30秒，置2～8℃作用45分钟，判定结果。 
1.6  结果判定  将微量板倾斜45度，对照孔的红细胞应完全沉淀到孔底ZX，呈泪珠样流淌；阳性孔的红细胞则均匀分布于孔底或呈锯齿样凝集，使红细胞完全凝集的ZD稀释倍数为该抗原的HA效价。 
1.7  工作抗原的配制  如果抗原凝集价测定结果为1:256（举例），则4个HA单位为1:64（256÷4=64），这时可将HI抗原用PBS缓冲液稀释64倍，即成4 HA单位的工作抗原液。
2   血凝YZ（HI）操作方法
2.1  在96孔微量板上，每行从第2孔开始，每孔加入25μl PBS缓冲液，直至第12孔。
2.2  分别在第1、2、12孔中加入处理过的待检血清25μl。  
2.3  用加样器从第2孔起作2倍系列稀释，直至第10孔（血清稀释倍数从第1孔的1:4、第2孔的1:8……至第10孔的1:2048），弃去25μl。 
2.4  向第1～11孔中加入25μl 4 HA单位的抗原，在微量振荡器上振荡30秒，室温下作用30分钟。  
2.5  每孔加入25μl红细胞悬液，振荡30秒，放2～8℃下反应30～45分钟，判定结果。  
2.6  判定  判定时将微量板倾斜45度，只有当抗原对照孔（第11孔）中红细胞完全凝集，血清对照孔（第12孔）中的红细胞完全沉淀时，当阴性血清HI抗体效价不高于1:8，阳性血清HI抗体效价与已知效价相比误差不高于1个滴度时，试验方为成立。若红细胞沉淀呈泪珠样流淌，判为HI阳性；若红细胞在孔底均匀分布或呈锯齿状凝集，判为HI阴性。以完全YZ红细胞凝集的ZG稀释倍数作为待检样品的HI抗体效价。
【注意事项】
（1）对HA和HI试验结果影响因素很多，应严格按照试验程序进行操作，尤其应注意试验温度和作用时间。  
（2）准确配制1％鸡红细胞悬液，使用时应充分摇匀。  
（3）准确配制4 HA 单位的工作抗原，使用前需进行滴定，配制好的工作抗原应在2小时内用完。  
（4）抗原及阳性血清按规定在-20℃以下冷冻保存，使用时融化后摇匀；抗原应根据所测样品的数量用多少稀释多少，未用完的抗原仍在-20℃以下冷冻保存，该抗原可反复冻融。
（5）本抗原使用应按实验室生物安全有关规定进行操作，用完的器皿、吸头等应彻底消毒。
【贮藏与有效期】-20℃保存，有效期为12个月

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