AtT-20；小鼠垂体瘤细胞[分泌促生长激素分泌激素]

AtT-20；小鼠垂体瘤细胞[分泌促生长激素分泌激素]    
细胞编号：    C5074
细胞缩写：    AtT-20细胞
细胞名称：    AtT-20(小鼠垂体瘤细胞)
详细背景：    AtT-20细胞生长时不贴壁，而结成活细胞团。能抗脊髓灰质炎病毒。检测发现肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。
细胞来源：    细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
"购买细胞注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，AtT-20；小鼠垂体瘤细胞[分泌促生长激素分泌激素]了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。"    P4
包装规格：    复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
细胞规格：    1*10(5)/ml——1*10（6）/ml
安全水平：    1
细胞种属：    小鼠
组织来源：    垂体；瘤
细胞形态：    小的圆形细胞
细胞特性：    详见细胞说明书部分
细胞融合度：    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测：    细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
"细胞培养三不要：
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：
1. 不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。（当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高）
其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯。
2. 不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长。
3. 不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，37度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。"    详见细胞说明书
传代方法：    建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件：    AtT-20；小鼠垂体瘤细胞[分泌促生长激素分泌激素]详见细胞说明书
主要文献：    请具体查阅相关发表文章
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。
欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2，其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，AtT-20；小鼠垂体瘤细胞[分泌促生长激素分泌激素]及时传代后，细胞的生长得以继续。
培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。
解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷氨酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素CJ；血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2周内用完;分离培养物，检测支原体。
冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。CRL-5872    NCI-H1437细胞株    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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CRL-5942    NCI-H2347细胞株    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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HTB-119    NCI-H69细胞株    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
CRL-5815    NCI-H727细胞株    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，AtT-20；小鼠垂体瘤细胞[分泌促生长激素分泌激素]能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
CRL-5816    NCI-H810细胞株    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
CRL-5817    NCI-H889细胞株    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
CRL-1629    SCC-9细胞株    ，公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！