抗荧光淬灭PVP封片液品Pai
品Pai:百奥莱博
规格:5ml
编号:YT096
本品是一种采用polyvinylpyrrolidone(PVP)为主要封片介质,用于减缓荧光淬灭的封片试剂。可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭。操作简单,在封片时用移液器滴一滴抗荧光淬灭封片液在样品上,盖上盖玻片即可完成操作。本封片液封片后,不使用盖玻片也可以直接在显微镜下观察。PVP干燥后会在样品表面产生一层保护膜。本抗荧光淬灭PVP封片液是一种使用比较方便的抗荧光淬灭封片液,相对不易产生气泡,封片液的流动性比较好,封片比较方便。封片后盖上盖玻片,盖玻片会被很好地粘附在载玻片上。按照每个样品封片需要50微升计算,足够用于100个样品的封片。
注意事项:
1. 使用完毕,请注意拧好瓶盖。抗荧光淬灭PVP封片液中的水分不断挥发,会导致该封片液逐渐变得非常粘稠。本封片液本身有一定的粘稠性,粘稠度略高于甘油,但由于水分过度蒸发出现过于粘稠至不便使用或有微生物污染则宜丢弃。
2. 使用本封片液封片后,随着封片液中的水分逐渐减少,折光率会逐渐上升。折光率的变化通常不会影响样品染色部位的观察,但会影响到样品未染色部分的观察。
3. 荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。可以向百奥莱博选购各种型号的载玻片存储盒。
4. 在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·PVP封片液
编号:YT094
英文名称:Polyvinylpyrrolidone Mounting Medium
规格:10ml
本品是一种采用polyvinylpyrrolidone(PVP)为主要封片介质的水性封片液,可以用于常规的各种切片、涂片等的封片。本PVP封片液中的主要有效成分为PVP和甘油。本封片液封片后,不使用盖玻片也可以直接在显微镜下观察。PVP干燥后会在样品表面产生一层保护膜。本PVP封片液几乎是一种易用的封片液,相对不易产生气泡,封片液的流动性比较好,封片比较方便。封片后盖上盖玻片,盖玻片会被很好地粘附在载玻片上。 按照每个样品封片需要50微升计算,足够用于200个样品的封片。
注意事项:
1. 使用完毕,请注意拧好瓶盖。PVP封片液中的水分不断挥发,会导致该封片液逐渐变得非常粘稠。本封片液本身有一定的粘稠性,但由于水分过度蒸发出现过于粘稠至不便使用或有微生物污染则宜丢弃。
2. 使用本封片液封片后,随着封片液中的水分逐渐减少,折光率会逐渐上升。折光率的变化通常不会影响样品染色部位的观察,但会影响到样品未染色部分的观察。
储存条件:室温,有效期一年。
抗荧光淬灭PVP封片液品Pai关键词:Antifade Polyvinylpyrrolidone Mounting Medium,YT096,抗荧光淬灭PVP封片液
·PI3KYZ剂(LY294002)
编号:YT333
英文名称:PI3K Inhibitor
规格:10mg/ml×0.1ml|5mg|25mg
本品是一种常用的phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)YZ剂。LY294002可以通透细胞,特异性YZPI3K,YZPI3K/Akt信号途径,包括常见的YZAkt磷酸化等。LY294002对于纯化的PI3K的IC50为1.4 μM。
CAS:154447-36-6
分子式:C19H17NO3
分子量:307.3
纯度:>98%
储存条件:-20℃,有效期6个月。
·双萤光素酶报告基因检测试剂盒
编号:YT273
英文名称:Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
规格:100次|1000次
本试剂盒是先以萤光素为底物来检测萤火虫萤光素酶,后以肠腔素为底物来检测海肾萤光素酶,并且在后续加入海肾萤光素酶底物时,同时加入YZ萤火虫荧光素酶催化luciferin发光的物质,使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性,实现双萤光素酶报告基因检测。
试剂盒组分:
报告基因细胞裂解液 | 60ml | 萤火虫萤光素酶检测试剂 | 10ml | 海肾萤光素酶检测缓冲液 | 10ml | 海肾萤光素酶检测底物(100×) | 100μl |
萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物萤光。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化coelenterazine氧化成coelenteramide,在coelenterazine氧化的过程中也会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。本试剂盒的检测原理参考下图。
双萤光素酶的检测原理图。
通过萤光素酶和其底物这一生物发光体系,可以非常灵敏、GX地检测基因的表达。通常把感兴趣
基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。Renilla luciferase相对更多地被用作转染效率的内参,以消除细胞数量和转染效率的差异。萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的强发光波长为560nm。海肾萤光素酶催化coelenterazine发光的强发光波长为465nm。
注意事项:
1. 加入海肾萤光素酶检测工作液后对于上一步骤中的萤火虫萤光素酶的YZ可以达到99%以上。但总会残留微量活性,因此,宜在转染时把海肾萤光素酶的表达量控制在其RLU读数高于萤火虫萤光素酶RLU读数的10%。海肾萤光素酶的读数高于萤火虫萤光素酶的读数是完全可以的,通常不会有明显的负面影响。
2. 为取得测定效果,在用单管的化学发光仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同的时间内,例如30秒内;使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,宜先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫萤光素酶检测试剂。
3. 由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
4. 为保证萤光素酶检测试剂的稳定性,可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时
间暴露于室温。经测试,反复冻融三次,对测定结果无明显影响。
5. 样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品宜使用相同的测定时间。
6. 海肾萤光素酶检测底物(100×) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发,有时会在初次使用时发现体积明显小于100μl的情况,此时用无水乙醇把体积补足至100μl,并混匀后即可使用。
7. 海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用,-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降,因此不可配制成工作液后长期保存。
储存条件:-20℃,有效期一年。
抗荧光淬灭PVP封片液品Pai关键词:Antifade Polyvinylpyrrolidone Mounting Medium,YT096,抗荧光淬灭PVP封片液
·感受态细胞快速制备试剂盒
编号:YT022
英文名称:One Step Competent Cell Preparation Kit
规格:200次
本试剂盒是一种用于大肠杆菌感受态细菌快速制备的试剂盒。一步法感受态细菌制备试剂盒是在经典的TSS法的基础上进行适当改良而成,既继承了TSS法的快速和简便,又在此基础上提高了感受态细菌的转化效率和易操作性。使用本试剂盒可以使感受态效率达到106以上。不仅可以转化质粒,而且可以转化普通的连接产物。另外,对细菌的培养条件要求比较宽松,培养的细菌只要处于对数期内就可以使用本试剂盒制备感受态细菌。
使用本试剂盒操作非常简单,细菌培养好后仅需十几分钟就可以完成感受态细菌的制备。本试剂盒适用于绝大部分常见的大肠杆菌,包括DH5α、JM109、TG1、HB101和XL-1等。对于一些用于蛋白表达或病毒质粒构建的特殊大肠杆菌也适用,制备出来的感受态菌转化质粒肯定没有问题,但如果转化连接产物有时效果不如DH5α等其它常见的细菌。本试剂盒提供了DH5α甘油菌作为菌种,可以用于制备感受态细菌。本试剂盒可以分多次使用,共可以制备足够进行200-400次转化的感受态细菌。
注意事项:
1. 需自行配制LB液体培养基和LB平板以用于细菌的培养和感受态效率的检测。
2. 尽管经过我们的测试凡是处于对数期内的细菌都可以用于感受态细菌的制备,但如果细菌生长的OD600的值达到0.3-0.5左右时,制备出来的感受态效果。
3. 在制备感受态细菌的过程中均使用不含抗生素的LB。在使用感受态菌的过程中热休克后的37℃培养时也必须使用无抗生素的LB,即便转入的质粒是有抗性的。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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