产地:国产|进口
规格:100次
品Pai:百奥莱博
编号:RFT008
● 产品简介:
本产品是由8条带状双链DNA条带组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品中已含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。8条带的大小分别为500,1000,1500,2000,2500,3000,3500,5000bp。其中2000bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度为50ng/5μl。
● 储存条件:4℃ 贮存6个月(-20℃贮存一年)。
● 使用方法:1.取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm加样孔宽度加1μl,如果加样孔较宽,可以适当增加上样量)就行电泳。
2.建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间35-40分钟。
3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注:如果使用Goldview等染料就行染色,由于灵敏度比EB低,请酌情增加Marker的上样量。
● 注意事项:1.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
关于500bp DNA ladder(500-5000bp)品Pai的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·100bp DNA ladder(100-1500bp)
编号:RFT001
规格:100次
● 产品简介:
本产品是由11条带状双链DNA组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。本产品为即用型产品,已含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。 本产品中11条带为100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1500bp,其中500bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度为50ng/5μl。
● 储存条件:4℃ 贮存6个月,-20℃贮存 1年。
● 使用方法:1.取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)进行电泳。
2.建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间30-35分钟。
3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注:如果使用Goldview等染料就行染色,由于灵敏度比EB低,请酌情增加Marker的上样量。
● 注意事项:1.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
500bp DNA ladder(500-5000bp)品Pai关键词:500-5000bp,百奥莱博,500bp DNA ,RFT008,500bp DNA ladder(500-5000bp)
·蛋白快速染色液
编号:RFT053
规格:500ml
● 储存条件:常温贮存,开封后一年有效。如4℃贮存,会有结晶形成,37℃温浴融化后可继续使用。
● 产品简介
本产品是以考马斯亮蓝G-250为主要成分,采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。
特点:方便快捷-不用漂洗,不用加热,不用脱色,不用固定,条带2分钟可见。
灵敏度高-检测下限10ng蛋白
兼容性好-适用于变性和非变性胶以及质谱分析
绿色环保-不含甲醇,冰醋酸
● 用前必读:1 使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2以下“使用方法”是针对0.75mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
● 使用方法:1. 将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中,用适量蒸馏水漂洗一下。
2. 弃蒸馏水,加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适),摇床上常温摇动,根据下表确定染色时间。
待检测蛋白量 染色时间
>1 μg 2分钟
100ng-1μg 10分钟
10ng-100ng 60分钟
3. 观察记录结果。
● 附:质谱处理程序
1. 切下待检蛋白条带置于1.5ml离心管中。
2. 加入1ml 30%乙醇或30%丙酮(也可用30%醋酸,但会导致蛋白N端酰基化)。
3. 处理30分钟。
4. 重复步骤2,3直到去除所有染料。一般处理2-3次既能完全去除染料。
5. 质谱分析。
● 注意事项:1. 使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2. 常规染色所需的漂洗,固定,脱色步骤都无必要。
3. 本染色液可以重复利用1-2次,敏感性会有轻微下降,请延长染色时间。
4. 本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。使用后,请盖好瓶盖,常温密封保存。
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·超低分子量蛋白Marker(3.3-45kD)
编号:RFT047
规格:10次
● 储存条件: -20℃保存,开封后有效期12个月。
● 产品简介:
本产品包含2种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.3kD-45kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
● 使用说明:一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用;本产品每次使用前,要95℃加热处理5分钟。
一. 制胶:I 配制分离胶
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2.加入10%APS和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4.静置5-10分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
注:如非必须,不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2.加入10%过硫酸铵和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
4.静置20-30分钟装待凝胶聚合
二. 电泳:1. 取一管分装好的Marker样品,彻底融化,95℃加热处理5分钟,充分混匀后备用。
2. 电泳前,将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液(Cat No:CB010)用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液,轻柔拔出梳子,将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,根据表二条件进行电泳,至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。注:如果电泳时间过短,染色时,指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
三. 染色
根据常规实验步骤,用配方5和6(表三)进行染色和观察。如果使用配方5进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的FastBlue蛋白染色液(Cat No:RTD6202),该产品能在5分钟之内完成蛋白的染色,不至于小肽在染色和脱色中从凝胶中脱离,是常规染色液的理想替代品。
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信息说明
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