编号:RFT078
规格:10次
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
● 产品组成:组分 名称 规格 贮存 运输
组分1 2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 15 ml 4℃ 常温
组分2 2×多肽电泳分离胶缓冲液 30 ml 4℃ 常温
组分3 2×PAA溶液 超低浓缩胶用 15 ml 4℃ 常温
组分4 2×PAA溶液 超低分离胶用 30 ml 4℃ 常温
组分5 10% APS(干粉) 5 ml 常温 常温
组分6 TEMED 0.5 ml 常温 常温
组分7 10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS) 500 ml(干粉) 常温 常温
组分8 2×Tricine 上样缓冲液(含还原剂) 1 ml -20℃ 常温
组分9 FastBlue蛋白染色液 500 ml 常温 常温
● 产品简介:
本试剂盒含有超低分子量蛋白电泳(多肽电泳)全套试剂,可以用来检测1-20kd的多肽大小。本试剂盒可配制至少10块常规大小的PAGE胶(8×10cm)。具有以下特点:1 适用范围广:2×多肽电泳缓冲液和2×PAA溶液中不含有SDS,适用于多肽的变性和非变性电泳。
2 分辨率高:凝胶缓冲液独特配方,可以有效分离1-5kD多肽。
3 稳定性高:凝胶缓冲液pH为中性,存放时间长。
4 使用方便:配制凝胶时只需1:1混合2×凝胶缓冲液和2×PAA溶液,加上APS和TEMED即可配制凝胶。
● 贮存和效期:按照标签温度贮存;开封后有效期一年。
● 使用说明:一. 10% APS配制:10% APS配制-5 ml:将APS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10% APS。
二. 制胶:I 配制分离胶
1.按照表一将不同体积的成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
表一 (一块1 mm mini胶用量)*
分离胶 浓缩胶
18%T /5 ml 5%T /2 ml
2×多肽电泳浓缩胶缓冲液 / 1 ml
2×多肽电泳分离胶缓冲液 2.5 ml /
2×PAA溶液 超低浓缩胶用 / 1 ml
2×PAA溶液 超低分离胶用 2.5 ml /
10%APS 45-60 μl** 20-30 μl
TEMED 5 μl 2 μl
注: * 如非必须,不要使用厚度1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75m和1mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
** 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合时间会延长。可以根据表二的标准条件调节催化剂的加入量。
表二 超低凝胶制备凝固时间表
环境温度 20℃
分离胶配制 浓缩胶配制
分离胶配制量 5 ml -
浓缩胶配制量 - 2 ml
10%APS 50 μl 20 μl
TEMED 5 μl 2 μl
凝固时间 5-10 分钟 20-30 分钟
2.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的无水乙醇层,使凝胶表面保持平整。
3.静置5-10分钟,待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1.按照表一将不同成分加入到小烧杯或离心管中混合;立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
2.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3.静置20-30分钟待凝胶聚合
三. 电泳:10×Tricine-Tris-SDS缓冲液配制:将10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS)粉末(Cat No:CB010P)置于一干净的一升烧杯中,加入500ml超纯水,彻底搅拌混匀,不要调节pH,即配成500ml 10×TTS缓冲液。
表三 1×TTS缓冲液配制
1×TTS配制量 500 ml 1×TTS配制量 1000 ml
10×TTS 50 ml 100 ml
超纯水 450 ml 900 ml
注:伯乐Mini III电泳槽一次电泳使用500ml 1×TTS缓冲液。
将电泳槽的内槽加满1×TTS缓冲液,轻柔拔出梳子,用1ml移液器将梳孔吹洗干净,将Marker或蛋白样品(已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,稳压电泳(表四),至蓝色指示前沿至分离胶下沿位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2.5-3个小时。
表四 多肽电泳条件
恒电压 150V
起始电流 60-75mA/板胶
结束电流 15-25mA/板胶
电泳时间 2.5-3小时
四. 染色(使用组分9-FastBlue蛋白染色液):● 用前必读:1 使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2以下“使用方法”是针对0.75mm和1.0 mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
● 使用方法:1. 将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中,加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适),条带1-2分钟即可见。
2. 摇床上常温摇动10-15分钟。
3. 观察结果。
● 注意事项:1. 使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm和1mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2. 常规染色所需的漂洗,固定,脱色步骤都无必要。
3. 本染色液可以重复利用1-2次,敏感性会有轻微下降,请延长染色时间。
4. 本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。使用后,请盖好瓶盖,常温密封保存。
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·1×Western半干转转膜液
编号:RFT079
英文名称:Western Semi-dry Transfer Buffer
规格:1L(粉末)
1×Western半干转法膜液可以用于Western时半干法电转膜。
本Western半干法转膜液是一种安全的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。
配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷,不需要调节pH值。
本Western转膜液共1瓶,可以配制1升Western半干转膜液。
保存条件: 室温保存,两年有效。
注意事项: 配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。配制好的半干法转膜液长期存放后,如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应丢弃。
需使用分析纯级别的乙醇或纯度更高的乙醇。
使用说明:1. 取一瓶可以配制1升Western转膜液的粉剂,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水到约700毫升,溶解。
2. 再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇,混匀。
3. 然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用,无需调节pH值。没有用完的转膜液可室温或4℃保存,通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时,应该丢弃。
·RNA酶YZ剂
编号:RFT107
英文名称:Western Semi-dry Transfer Buffer
规格:2000U|5×2000U
● 产品简介:
本产品是一种大肠杆菌表达的重组蛋白,可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNase A、RNase B或RNase C结合,并YZ这三种酶的活性,保护RNA不被这三种酶降解。但本RNase Inhibitor不能YZRNase I、T1、T2、H、U1、U2和CL3的酶活性。
特点:不含DNA内切酶和外切酶,用于各种RNA相关反应,防止RNase的污染。
用途:用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解;还可用于特定RNase活性的鉴定等。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为人类胎盘中编码该酶的基因。
分子量:约49.6 kDa(单体)。
活性定义:将能够YZ5ng RNase A的50% 活性的酶量定义为一个活性单位。
活性检测条件:100mMTris-HCl (pH7.5),1.2mMEDTA,0.1mg/ml BSA,100ng/ml RNase A,0.1mg/ml E.coli [3H]-RNA,50mg/ml yeast RNA,8mMDTT。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
储存溶液:20mMHEPES-NaOH (pH7.5),50 mMNaCl,8 mMDTT,0.5 mMDetergent,50% (v/v) glycerol。
● 使用说明:对于cDNA合成、体外转录、体外翻译等常见的反应体系中,为保护其中的RNA不被RNase降解,RNase Inhibitor推荐用量为终浓度1-2U/μl。
北京超低分子量蛋白电泳试剂盒现货价格关键词:百奥莱博,超低分子量蛋白电泳试剂盒,RFT078
·DH5α化学感受态细胞
编号:RFT112
规格:20×100ul
● 储存条件:-70℃冻存六个月
● 产品简介:
本公司生产的DH5α感受态细胞采用经特殊工艺处理得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测,转化效率可达108cfu/μg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
● DH5α菌株介绍:基因型:supE44△lacU169(j80 lacZ△M15)hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1
特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的YZ型菌株。其j80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。
● 操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
以下实验以100 μl感受态细胞为例。
2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100 μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。
3 将离心管置于42℃水浴中放置45-90秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。
4 向每个离心管中加入500 μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5将离心管内容物混匀,吸取100 μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12-16小时。
注:涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300 μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)
注意事项:1. 感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。
2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3. 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到Z低。
北京超低分子量蛋白电泳试剂盒现货价格关键词:百奥莱博,超低分子量蛋白电泳试剂盒,RFT078
S-腺苷高半胱氨酸水解酶 SP Sepharose Fast Flow 9025-54-1
3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷 Fmoc-Asp(OtBu)-OH 487-60-5
ARB13729 兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)elisa测定使用说明书 Rabbit nuclear factor-κb p65,nf-κb p65 ELISA KIT
ARB13836 猪β干扰素(IFN-β/IFNB)Elisa方法检测 Porcine interferon β,ifn-β/ifnb ELISA KIT
十五醇 MDH 629-76-5
BTN130578 小鼠抗V5标签单抗 Anti V5-Tag Mouse Mab
蔗糖溶液(Sucrose) Sucrose Solution 20%||1mol/L|2mol/L 100ml
BTN81212 一站式蛋白非变性PAGE套装 One-Stop Protein Native PAGE Pack
BL0808 HRP标记羊抗人IgM抗体
酰基辅酶A合成酶 Sodium oxamate 9013-18-7
低糖DMEM(含双抗) 500ml
盐酸二甲双胍 4-Nitroacetanilide 1115-70-4
F030442 胶体金标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY*GOLD
60-18-4 L-Tyrosine L-酪氨酸
L-苏氨醇 DL-Phenylalanine 3228-51-1
ARB12993 小鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)Elisa定量检测 Mouse anti-cardiolipin antibody iga,aca-iga ELISA KIT
丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR MU-α-Gal 65546-95-4
719阴离子交换树脂 MEHQ 63181-94-2
ARB11507 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA代测服务 Human lipoprotein-associated phospholipase a2,lp-pl-a2 ELISA KIT
SP葡聚糖凝胶C-50 L-Ornithine HCL 61374-06-9
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