Proclin 系列防腐剂
| 为解决生物样本处理过程中保存期短的问题,SUPELCO 公司推出新一代GX生物防腐剂 ProClin150,200,300,5000,可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长。当浓度达到 0.02% 条件下,ProClin 系列防腐剂具有广谱KJ活性,能在比较长的时间内YZ细菌、真菌和酵母菌 等微生物的生长;同时,它又能保持体系中酶的活性,因此它是一种理想的可替代硫汞撒、叠氮 化钠和庆大霉素等生物防腐剂。
| 一、ProClin 系列防腐剂的优点
| • 广谱KJ性,作用速度快;良好的与酶的相容性,不会影响与酶或抗体的 相关反应。
| • 使用剂量少,6-20ppm 的 ProClin300 即可达到YJ的目的。
| • pH 适用范围广(pH2-8.5* ),化学稳定性好。经实验室检测,在 25 度下保存 2 年,该防 腐剂的活性组分仅损失 3%。
| • 毒性远低于同类产品硫柳汞。
| • 与水可以任意比混合。
| 二、ProClin 系列防腐剂作用原理
| ProClin 系列防腐剂的活性成分主要是 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和 5-氯-2-甲基-4- 异噻唑啉-3-酮(CMCI)。这两种成分YZ细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分 在与细胞膜接触几分钟后,立即可以渗透到膜内并YZ细胞内酶的活性(见图 1)。目标酶处于 细胞代谢 KREBS 循环的ZX位置,ProClin 系列防腐剂作用 KREBS 循环的四个不同位置(见图 2): 丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase),a -酮戊二酸脱氢酶(ketoglutarate dehydrogenase), 琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)和 NADH 脱氢酶(NADH dehydrogenase)。从而YZ细胞 生长代谢,大分子的合成,引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃,细胞不能合成 日常代谢所需要的化合物。所有的细菌及真菌至少拥有部分 KREBS 循环,所以 ProClin 系列防腐 剂的适用的范围非常广泛。其次,ProClin 系列防腐剂具有多标靶作用位点,因此大大降低了因 变异产生的微生物的耐药性。随着 KREBS 循环被阻断,细胞产生能量(以合成 ATP 为标志,见图 3)和合成酶等生物活性物质的能力迅速下降,但其使用剂量却保持比较低的水平对人畜无害。
| 三、ProClin 系列防腐剂性能
| 1. ProClin 系列防腐剂对诊断试剂影响:
| 实验数据表明,ProClin 系列防腐剂不会对诊断试剂中的关键酶与底物的结合速率产生 影响,比如:辣根过氧化酶(HRP),碱性磷酸酶(AP)。 图 4. 250ppmProClin300 对 HRP(AP)与底物结合速率的影响 短期效应 即使 ProClin300 的使用浓度超过推荐浓度 15 倍时,其短期内对于 HRP 和 AP 的 Km 和 Vmax 无影响(见表 1)。 表 1.ProClin300 对 HRP 和 AP 的 Vmax 的影响
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| Km(Mm) Vmax(ΔA/min/mg prrotein)
| 辣根过氧化酶(HRP) 6.9 904
| +15ppm ProClin300 6.8 861
| 辣根过氧化酶(HRP) 7.9 520 +250ppm ProClin300 8.3 525
| 碱性磷酸酶(AP) 0.69 138
| +15ppm ProClin300 0.56 131
| 碱性磷酸酶(AP) 1.40 153
| +250ppm ProClin300 1.20 142
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| 长期效应
| 长期使用 ProClin 300 同样不会对酶(例如:HRP 和 AP,见图 5)的活性产生影响。 图 5. 4 度(37 度)下 ProClin 对 AP (HRP)活性的影响
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| 2. ProClin 系列防腐剂对抗体结合的影响
| 在推荐使用浓度下,ProClin 系列防腐剂不会对抗体的结合产生影响。通过研究 ProClin 300 对经纯化过小鼠 IgM 抗原与联结 HRP 的抗-小鼠 IgM 抗体之间结合的影响,表明浓度在 300ppm 以下,ProClin 300 不会对其产生影响(见图 6)。50ppm 的 ProClin 300 保存上述抗体 35 天同 样无影响。 图 6. ProClin300 对连接 HRP 的抗体影响
| 四、ProClin 系列防腐剂的参数
| 应用 体外诊断试剂盒,校正液,对照液,有机试剂的保存 仅 ProClin5000 推荐使用在血清基质液的保存
| 1 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和 5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮
| 2 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮
| 3 数据在收集中
| 相关试剂
| HRP 酶稳定剂 ZB055 3500.00/100 克
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