简介:优宁维实验服务之IHC/ICC(免疫组化/免疫荧光)实验服务提供商:上海优宁维生物科技股份有限公司服务名称:免疫组化(IHC)实验服务 服务名称 | 标本要求 | 实验周期 | 单位 |
免疫组化 | 切片、爬片 | 3~4个工作日 | 每张切片 |
客户提供:样本:细胞涂片、细胞爬片、组织冰冻切片、组织石蜡切片;或组织、蜡块均可。
一抗(亦可由优宁维提供或代购,费用另计)
送样须知:市内可上门取样;外地可邮寄样本。信息保护:优宁维公司对客户项目的专有技术和资料(包括试验方案、试验结果和样品等)负有JD的保密责任免疫组化原理:免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。问题及其解答:产生组织切片非特异性染色的原因有哪些?如何解决?
1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是最重要的一条。
2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议SY单克隆抗体看看。
3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;
4)、非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;
5)、 DAB孵育时间过长或浓度过高;
6)、 PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要;
7)、标本染色过程中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。
免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些?
1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液,怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果?另外,不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索ZJ浓度。
2)、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是ZJ的时间和次数。若不行,还可高压修复。
3)、组织切片本身这种抗原含量低;
4)、血清封闭时间过长。
5)、DAB孵育时间过短。
6)、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应。
7)、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。 欢迎通过下方联系方式来电咨询~ 更多问题您可以「点击留言」
我们的优势:
1、专业的抗体公司 2、博士后领衔团队 3、先进的实验仪器平台
4、可靠、放心的结果 5、实惠、亲民的价格 6、认真、严谨的工作态度
公司简介:
上海优宁维生物科技股份有限公司( 简称:优宁维)是国内专业、全面的抗体供应商,抗体专家,专注于提供抗体和抗体相关产品以及抗体相关实验室服务。
优宁维2004年底成立于复旦科技园,2013年成立流式事业部,2014年成立设备事业部,2015年成立实验室服务事业部和产品研发部,2016年成立免疫组化事业部和电商事业部。总部位于上海,目前在全国有19个办事处,线下营销物流网络遍布ZG,正努力建设专业化的抗体网站(www.univ-bio.com),流式网站(fcm.univ-bio.com或www.my-fcm.com.cn),免疫组化网站(ihc.univ-bio.com或www.my-ihc.com.cn),实验室服务网站(labservice.univ-bio.com)等,更好更快更GX服务客户。优宁维正努力成为抗体专家,实验室服务专家,流式专家,免疫组化专家,继续在科研抗体细分市场深耕,整合打造专业化抗体平台,抗体新技术产品创新研发平台,抗体相关实验室服务平台等。
目前优宁维与近20家知名抗体公司合作,整合提供全方位的抗体及相关产品的专家服务,通过线下渠道和线上平台为超过5万个终端客户提供60万SKU的抗体专家式服务。
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