有关牛血清的使用问题
1、保存血清的方法?
我们建议血清应保存在-5℃~-20℃。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
2、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2---8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
3、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,如何处理?
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以1000转/分~2000转/分稍微离心,上清液即可直接加入培养基内使用。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
4、何谓热灭活?有无必要?
一般以56℃、30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
实验显示,即使对血清进行正确的热灭活处理,对大多数的细胞而言也是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。
而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是"小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。
因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保您的血清的质量。
质量控制、容器管道清洁度监控、设备及工艺卫生监控、膜可靠性监控、加工过程中间样品检测、加工时间控制。
5、如何避免沉淀物的产生?
我们建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭HX清及长时间的将血清置于高温环境中。
温馨提示:不可用于临床ZL。