Silkworm细胞,ATCC细胞

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稳定转染细胞株的构建
原理：
稳定转染，就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。
   
Silkworm细胞,ATCC细胞应用：
观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究）
一般流程：
1）   筛选浓度测定：以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2）   细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3）   细胞转染（病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6）
4）   利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5）   鉴定筛选结果
Silkworm细胞,ATCC细胞前期需要准备：
l          构建好的外源基因载体
l          待转染的细胞系（1×106个细胞，可传代，倍增时间小于48小时）以及细胞培养条件的说明
l          若需要检测靶基因的表达变化，请提供相应抗体
Silkworm细胞,ATCC细胞结果呈现：
构建好的稳定表达细胞系及相关的外源基因表达分析
YB-ATCC-3357    乳腺管癌    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3358    胎盘绒毛癌    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3359    乳腺管癌    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3360    恶性胚胎横纹肌瘤    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3361    乳腺细胞    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3362    神经胶质瘤    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3363    恶性胸膜间皮瘤    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3364    神经母细胞瘤    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3365    肺癌    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3366    胶质瘤    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3367    高转移肺癌    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3368    恶性黑色素瘤    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3369    肺腺癌 （胸膜渗出液）    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3370    黑色素瘤    进口美国ATCC细胞株，1ml/株
YB-ATCC-3371    肺腺癌    进口美国ATCC细胞株，1ml/株