细胞名称:
HTK细胞,ATCC细胞规格:1×10
6 5×10
6含量:>1x10
6 个/mL
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)
HTK细胞,ATCC细胞存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.
HTK细胞,ATCC细胞所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
(1)接种后60-80分钟,换液去除悬浮细胞
(2)原代培养24h,48h各换液一次
(3)
HTK细胞,ATCC细胞观察细胞情况,在原代培养7天左右时,如观察到成片的典型形态的细胞,在瓶底用Marker笔标记,0.25%胰酶消化,镜下观察控制,约5-10分钟(室温太低时应放置到孵箱中),加入全培养基终止消化,瓶体朝上,吸管轻轻吹打4-8分钟,尤其是标记部位。不要用力吹打,以免把贴壁较牢的成纤维细胞,上皮样细胞吹打下来
(4)传代到新瓶中,加入少量培养基,孵箱静置20-30分钟后,MSC大多牢固贴壁。瓶底朝上,轻轻吹打,丢弃悬浮以及贴壁不牢的细胞(大多是上皮样细胞),加入全培养基开始传代培养,如观察仍有较多杂细胞,可重复上述步骤。
(5)经上述处理后,原代的那瓶细胞仍有一些MSC生长,可继续按原代培养,如观察到MSC的克隆,仍可按上述步骤纯化处理。
(6)原代或传代的细胞如观察的少量成片的杂细胞,可直接镜下瓶底标记后,超净台里用长吸管JD机械刮除,吸出去掉。
HTK细胞,ATCC细胞目前临床上开展的关于干细胞的ZL项目多基于间充质干细胞,其中最常见的是干细胞。干细胞包含多种干细胞亚型,如造血干细胞、间充质干细胞、内皮祖细胞等。造血干细胞ZL血液系统疾病如白血病、淋巴瘤比较成熟,各个医院已经比较成熟。而间充质干细胞或笼统的干细胞在ZL其它系统疾病方面也有一些报道,如急性心肌梗死、糖尿病足等。目前这些ZL样本量少,缺乏随机对照试验,确切的LX尚有待进一步验证。
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