蛋白条带质谱检测（胶条鉴定）

技术原理与优势

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        质谱技术是目前检测蛋白质的核心鉴定技术，比如其中一个重要应用就是鉴定聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE)中凝胶上所含蛋白种类。
    
根据蛋白质谱分析所用质谱的离子源类型，我们提供分为以下两种技术路线：
    一、基质辅助激光解吸附电离—飞行时间质谱 （MALDI—TOF/TOF）:
MALDI的基本原始是将肽段分子分散在基质分子中并形成晶体，当用激光照射晶体时，基质分子吸收激光辐射的能量，从而使基质晶体升华，并带着肽段一起气化，进入质谱。基于 MALDI—TOF/TOF鉴定胶条上蛋白，首先蛋白胶条经过酶解成肽段，首先进行一级质谱（ＭＳ）获得肽段的质量数信息，在一级质谱获得的肽段信息的基础上，选着若干肽段进行碎裂，得到每个肽段的二级质谱（ＭＳ／ＭＳ）。根据二级质谱谱图（ＭＳ／ＭＳ）与数据库进行比对，从而得到肽段的序列信息，再根据肽段的信息进一步比对蛋白序列，得到蛋白的鉴定信息。
    特点：快速，通量高，但是由于每个样品点样本容量小，仅可鉴定到ZG丰度的１－２个蛋白；
    适用：经过纯化的蛋白样本 ，２Ｄ凝胶上单个蛋白点的鉴定
二、液相—电喷雾串联质谱联用（ＬＣ－ＥＳＩ－ＭＳ／ＭＳ）：
    ＥＳＩ技术是将待测分子溶解在溶剂中通过HPLC分离，以液相方式通过毛细管达到喷雾口，在喷雾口高压电场作用下形成带电荷的微滴，随着微滴中的挥发性溶剂蒸发，微滴表 面的电荷体密度随半径减少而增加，达到某一临界点时，样品以离子化的方式从液滴表面蒸发，进入质谱。
    特点：与液相色谱（LC）联用，可以对复杂样品进行质谱分析，明显提升质谱分析检测的效率和精确度
    适用：IP/Co-IP/Pull-down 纯化得到蛋白混合物样品，简单分离纯化后得到的蛋白胶条

应用领域

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         蛋白质表达谱鉴定
     相互作用蛋白鉴定
     蛋白质相对定量
     蛋白后修饰鉴定
     蛋白质亚基鉴定
     蛋白剪接体验证

实验流程

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送样须知         

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        送样胶条样本：考染或银染条带肉眼可见，条带清晰。银染胶不能经过甲醛或者戊二醛处理过，在电泳后保存在４℃，且尽早切胶送样。
        样本的保存：根据不同样品类型，样品请置于不同大小的离心管中，具体请向公司销售咨询。 

联系我们

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      基云（上海）生物技术有限公司  
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