新赛美生物研发的NcmSafe Blue Protein Stain快速蛋白质染色液为一种单组分染色剂,可直接对凝胶上分离的蛋白进行染色,用于SDS--PAGE凝胶、非变形PAGE凝胶,快速染色,在清晰背景上产生灵敏度ZD达到10ng的蛋白质的蓝色条带。本方法不需要甲醇、乙醇的固定和脱色,是一种无毒、无刺激性气味的高度环保型染色液。产品为即用型,性能稳定,操作便捷,灵敏度高,显色清晰,重复性好,安全性高,只需一小时或更短时间就可以轻松完成蛋白质的染色过程。
产品特色:1.即用型试剂: 无需配制。
2.灵敏度高: 可以检测低蛋白质低至10ng。
3.
安全性高:无需甲醇、乙醇、乙酸脱色,直接用去离子水脱色。
4.快速反应:大大降低了染色和冲洗所需的时间。
5.
无溶剂废物:通过消除有害物质的处理,让你节省时间和金钱。
NcmSafe Blue Protein Stain 操作步骤:1. 洗涤PAGE电泳胶:去离子水洗涤3次,每次约5min。
电泳结束后,取胶放入约200ml去离子水中,在侧摆或水平摇床上摇动5分钟,弃液体,再重复两次,共洗涤三次。
注意:本洗涤步骤的目的是为了洗去凝胶中的SDS等干扰物质。如果不能充分去除SDS会导致背景较高。
2. 染色:加入约30-50ml考马斯亮蓝快速染色液,染色1小时。
弃去离子水,加入适量的NcmSafe Blue Protein Stain快速蛋白染色液(每块大小约8×8厘米的 凝胶需使用约30-50ml),使染色 液能覆盖凝胶,且液面至少高出三个胶的厚度为宜,室温下在侧摆或水平摇床上进行染色,直至蛋白条带变清晰。
注意:推荐的室温(20-25℃)染色时间为1小时,实际染色时间可以根据染色效果自行调整,染色至能看到清晰的目标蛋白条带后,弃染色液,加入适量的去离子水,停止染色反应,然后即可拍照记录。延长染色时间,不会增加背景颜色。
3. 脱色:去离子水至少脱色30分钟 (或者过夜),脱色的PAGE胶可于去离子水中保存。
如果希望获得更加清晰的蛋白条带,可以加入约200ml去离子水室温洗涤约30分钟甚至过夜。通过去离子水洗涤可以进一步降低背景,获得更好的染色效果。
注意事项:1. 本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请带手套等保护设备。
2. 残留的SDS会增加染色背景及降低蛋白的分辨率,需充分去除SDS。
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