细胞名称 人肺癌细胞;A-427 [A427]保存
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系由Giard DJ建立,源自一位52岁的肺癌男性白人患者。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1% NEAA,1mM丙酮酸钠
传代方法 1:2~1:6传代,6~8天1次;每周换液2次。
传代情况 C4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买人肺癌细胞;A-427 [A427]保存到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
人肺癌细胞;A-427 [A427]保存操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人肺癌细胞;A-427 [A427]保存的特点:
1) 特异性强:只对肿瘤细胞进行有效识别和杀灭,而不伤害正常组织和细胞;抗瘤谱广。
2) 对体内各种肿瘤细胞均能有效ZL。
3) 安全性好,除可能出现的发热、少量出血外,无其他不良反应。
分裂图展示图:
人肺癌细胞;A-427 [A427]保存操作台的灭菌处理:
1)无菌室及无菌操作台(laminarflow)用紫外灯照射30-60分钟灭菌,70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟。2)细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 (注:实验操作应在抬面之ZY无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
PE标记的兔抗亲和素 0.1ml Rabbit Anti-Avidin/PE
PE标记的兔抗鸡IgG 0.1ml Rabbit Anti-chicken IgG/PE
Alexa Fluor 350标记的兔抗羊IgM 0.1ml Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 350
Alexa Fluor 350标记的兔抗人IgG 0.1ml Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 350
Alexa Fluor 555标记的兔抗猴IgG 0.1ml Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 555
罗丹明标记的兔抗大鼠IgG 0.3ml Rabbit Anti-rat IgG/RBITC
FITC标记的兔抗水貂IgG 0.3ml Rabbit Anti-Mink IgG/FITC
Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5
FRA-1多肽蛋白 1mg FRA1/FOSL1 peptide
CD19 0.5mg CD19(B-lymphocyte antigen CD19)
葡萄糖转运蛋白4(抗原) 0.5mg GLUT4(Glucose transporter type 4)
血管紧张素I抗原 0.5mg Ang I/AT1(Angiotensin I)
孕激素受体(抗原) 0.5mg PR (Progestogerone receptor)
染色盒同源物3抗原 0.5mg CBX3/HP1 gamma
囊性纤维化跨膜转运调节因子抗原 0.5mg CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator)
防御素β1抗原(人) 0.5mg Defensin Beta1(human)
插头蛋白M1抗原 0.5mg FOXM1/HFH 11 peptide
T7 tag标签抗原 0.5mg T7 tag(recombinant T7-tagged proteins)
粘附分子整合素β1抗原 0.5mg integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29)
雷帕霉素靶蛋白 0.5mg mTOR(Mammalian target of rapamycin)
P-钙粘附分子抗原 0.5mg P-cadherin(placental) rostaglandin F2α diethyl amide (10 mg) N,N-diethyl-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; PGF2α-NEt2|Dinoprost diethyl amide; Prostaglandin F2α diethyl amide
Unoprostone (5 mg) 9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-13,14-dihydro-15-oxo-20a,20b-dihomoprost-5-en-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto-20-ethyl Prostaglandin F2α|13,14-dihydro-15-keto-20-ethyl PGF2α; Unoprostone
Lisinopril (500 mg) N2-[(1S)-1-carboxy-3-phenylpropyl]-L-lysyl-L-proline; MK 521|MK 522; Lisinopril
Δ12-Prostaglandin J2 (500 ug) 11-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,9,12E-trien-1-oic acid; Δ12-PGJ2; Δ12-Prostaglandin J2
11-trans Leukotriene D4 (50 ug) 5S-hydroxy-6R-(S-cysteinylglycinyl)-7E,9E,11E,14Z-eicosatetraenoic acid; 11-trans LTD4; 11-trans Leukotriene D4
9(S)-HODE-d4 (100 ug) 9S-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic-9,10,12,13-d4 acid; 9(S)-HODE-d4
15-OxoEDE (100 ug) 15-oxo-11Z,13E-eicosadienoic acid; 15-KEDE; 15-OxoEDE
8-Isoprostane Affinity Column (20 ml) (1 ea) 8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane Affinity Column (20 ml)
Prostaglandin E2-MOX EIA Antiserum (100 dtn) Prostaglandin E2-MOX EIA Antiserum
15(S)-HpEDE (100 ug) 15S-hydroperoxy-11Z,13E-eicosadienoic acid; 15(S)-HpEDE
Transcription Factor p53 Designer Positive Control (1 ea) Transcription Factor p53 Designer Positive Control
Tris-Glycine Stock Solution (10X) (500 mL) Tris-Glycine Stock Solution (10X)
人肺癌细胞;A-427 [A427]保存
Oleyl TrifluoromePAF (10 mg) 1-O-hexadecyl-2-O-(9-carboxyoctanoyl)-sn-glyceryl-3-phosphocholine; Azelaoyl PAFthyl Ketone (1 mg) 1,1,1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one; OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone; Oleyl Trifluoromethyl Ketone
Myeloperoxidase Control (1 ea) Myeloperoxidase Control
SPHK Assay ATP (1 ea) SPHK ATP; SPHK Assay ATP
5-Aminosalicylic Acid (100 g) 5-amino-2-hydroxy-benzoic acid; 5-ASA|Mesalazine; 5-Aminosalicylic Acid
REV 5901 (100 mg) 。alpha。-pentyl-3-(2-quinolinylmethoxy)-benzenemethanol; REV 5901