细胞名称 人子宫颈鳞状细胞癌细胞;SiHa保存
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来源于一位日本病人的手术切除的肿瘤组织。电镜下可以看到细胞间典型的桥粒和细胞质中大量的张力丝。1975年发现有支原体污染,而后被去除。该细胞整合有HPV16基因组,每个细胞中有1~2个拷贝。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C36
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买人子宫颈鳞状细胞癌细胞;SiHa保存到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
人子宫颈鳞状细胞癌细胞;SiHa保存操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
人子宫颈鳞状细胞癌细胞;SiHa保存的特点:
1) 特异性强:只对肿瘤细胞进行有效识别和杀灭,而不伤害正常组织和细胞;抗瘤谱广。
2) 对体内各种肿瘤细胞均能有效ZL。
3) 安全性好,除可能出现的发热、少量出血外,无其他不良反应。
分裂图展示图:

人子宫颈鳞状细胞癌细胞;SiHa保存操作台的灭菌处理:
1)无菌室及无菌操作台(laminarflow)用紫外灯照射30-60分钟灭菌,70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟。2)细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 (注:实验操作应在抬面之ZY无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
9-Methoxycamptothecin 9-甲氧基喜树碱 19685-10-0 20mg
Esculentoside A 商陆皂苷甲 65497-07-6 20mg
Abrine 相思子碱 21339-55-9 20mg
Melamine 三聚氰胺 108-78-1 100mg
Irinotecan Hydrochloride 伊立替康 97682-44-5 20mg
移液器架(圆型) 七支枪 个
超滤离心管 0.5ml-50KD 0.5ml 个
Simvastatin 辛伐他丁 1g 瓶
TRIS 5kg 瓶
Testosterone 睾酮(睾甾酮) 1g 瓶
钙荧光探针Fluo-3, AM 100 μg 支
Bis Benzlimide Hoechst NO33342 荧光染料 25mg 瓶
Lyticase 溶壁酶 5ku 瓶
Guanie 鸟嘌呤 5g 瓶
2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料) 5×1ml 瓶
anti-GAPDH Rabbit Polyclonal antibody 100ul 瓶icriviroc Maleate, SCH 417690, SCH-D Vicriviroc Malate
Isovaleryl-Val-Val-Sta-Ala-Sta-OH Pepstatin A
Q-Val-Glu-OPh QVD-OPh Negative Control
(1aR-[1aR,4E,7aS,-10aS,-10bR])-2,3-6,7,7a,8,10a,10b-octahydro-1a,5-dimethyl-8-methyleneoxireno[9,10]cyclo deca[1,2-b]furan-9(1aH)-one Parthenolide
(2S)-2-([(3,5-Difluorophenyl)acetyl]amino)-N-[(3S)-1-methyl-2-oxo-5-phenyl-2,3-dihydro-1H-1,4-benzodiazepin-3-yl]propanamide Compound E
(S)-4-ethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3’,4’:6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-3,14-(4H,12H)-dione Camptothecin (2 mM)
2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium,monosodium salt WST-8
N- Pluripotin
1,2-Bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid tetrakis(acetoxymethyl ester) BAPTA AM
(S)-5-chloro-N2-(1-(5-fluoropyrimidin-2-yl)ethyl)-N4-(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)pyrimidine-2,4-diamine AZD1480
人子宫颈鳞状细胞癌细胞;SiHa保存t-Butyl-2-((6R)-4-(4-chlorophenyl)-2,3,9-trimethyl-6H-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-6-yl)acetate (-)-JQ1
(R)-3-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-5-(2-fluoro-4-iodophenylamino)-8-methylpyrido[2,3-d]pyrimidine-4,7(3H,8H)-dione TAK-733
3-(2-Chlorophenyl)-N-(4-chlorophenyl)-N,5-dimethylisoxazole-4-carboxamide EZSolution TGR5 Receptor Agonist
N- Clorgyline hydrochloride
(T-4)-[(1E,6E)-1,7-Bis[4-(dimethylamino)phenyl]-1,6-heptadiene-3,5-dionato-kO3,kO5]difluoroboron CRANAD-2
Prionex Prionex
EZExtract Polyubiquitin Buffer Kit EZExtract Polyubiquitin Buffer K