尿嘧啶糖基化酶进口

产品介绍：

尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG）来源于大肠杆菌重组克隆表达，分子量为25kDa，可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶。UNG酶对RNA无活性，主要应用于PCR扩增产物的防污染。其作用原理基于：如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中，形成了含dU碱基的PCR扩增产物，该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键，降解该PCR扩增产物。

规格：1U/μl

储存缓冲液：

20mM Tris-HCl(pH8.0，25℃)，150mM NaCl，1mM EDTA，1mM DTT，0.05% Tween20，50%glycerol.

试剂组成：尿嘧啶糖基化酶进口



10×Reaction Buffer：200mM Tris-HCl(pH8.0，25℃)，100mM NaCl，10mM EDTA，1mg/ml BSA.

活性定义：

37℃条件下，1小时降解1µg含dU碱基的单链DNA的酶量为1单位。

保存条件：尿嘧啶糖基化酶进口



每天或每周使用保存于-20℃。长期储存应保存于-70℃保存，并严格避免-70℃保存时反复冻融。

质量控制：

1、SDS-PAGE电泳纯度大于98%；

2、1U UNG在 37℃处理3分钟后，103拷贝以下含U模版应完全降解，不能产生扩增产物。

3、无核酸外切酶和核酸内切酶活性、RNase酶活性；

（1）SDS-PAGE 银染纯度大于98%尿嘧啶糖基化酶进口

 





（2）UNG 酶消化能力试验

    以700bp含dUTP的不同拷贝数基因片段为模板，分别加入含0.5U UNG酶的50μl PCR反应体系，50℃ 消化2min，94℃ 灭活4min后进行PCR扩增反应。

A. Biori UNG



B. Promega UNG



 

Lane 1：Negative control （no template）；

Lane 2：positive control（no UNG）；

Lane 3~lane 10: 103 to 1010 copies of template 

结果表明，我们的UNG酶与Promega UNG酶消化效果相当，均可以有效控制108拷贝以下含有U-DNA的模板的污染。

（3）UNG酶稳定性实验