沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
Hydroxymethylglutaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit
大鼠载脂蛋白C2(APOC2)ELISA试剂盒 Rat Hydroxymethylglutaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit
大鼠载脂蛋白C1(APOC1)ELISA试剂盒 Rat dynorphin,Dyn ELISA Kit
大鼠载脂蛋白B100(APOB100)ELISA试剂盒 Rat Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1,LTBP1 ELISA kit
大鼠载脂蛋白B(APOB)ELISA试剂盒 Rat Prostaglandin H2,PGH2 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白A5(APOA5)ELISA试剂盒 Rat prostaglandin F synthase,PGFS ELISA Kit
大鼠载脂蛋白A4(APOA4)ELISA试剂盒 Rat Prostaglandin F2-alpha receptor,PTGFR ELISA kit
大鼠载脂蛋白A2(APOA2)ELISA试剂盒 Rat Prostaglandin E metabolite,PGEM ELISA Kit
大鼠载脂蛋白A1(APOA1)ELISA试剂盒 Rat prostaglandin E2 synthase,PGES ELISA Kit
大鼠孕烷X受体(PXR)ELISA试剂盒 Rat Prostaglandin D Synthase,PGDS ELISA Kit
大鼠孕酮(Pg)ELISA试剂盒 Rat Prostaglandin D2,PGD2 ELISA Kit
大鼠原肌球蛋白2β(TPM2)ELISA试剂盒 Rat prostacyclin synthase,PGIS ELISA Kit
大鼠原卟啉原氧化酶(PPOX)ELISA试剂盒 Rat prostacycline,PGI2 ELISA Kit
大鼠诱导型一氧化氮合酶(NOS2)ELISA试剂盒 Rat Prokineticin-2,PROK2 ELISA kit
大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(fT3)ELISA试剂盒 Rat prealbumin,PA ELISA Kit
大鼠硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)ELISA试剂盒 Rat glucokinase,GK ELISA Kit
大鼠硬骨素(SOST)ELISA试剂盒 Rat glucose-6-phosphatase,G-6-Pase ELISA Kit
大鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒 Rat bovine serum albumin(BSA)antibody IgG ELISA kit
大鼠音猬因子(SHH)ELISA试剂盒 Rat Protein
Carboxypeptidase A2 英文名称: 羧肽酶A2抗体 ?0.1ml
Contactin 3 英文名称: 脑源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗体 ?0.1ml
Carboxypeptidase B1 英文名称: 胰羧肽酶B1抗体 ?0.1ml
CRABP2 英文名称: 细胞维甲酸结合蛋白2抗体 ?0.1ml
C2orf80 英文名称: 2号染色体开放阅读框80抗体 ?0.2ml
phospho-CD32B(Tyr291) 英文名称: 磷酸化CD32B抗体 ?0.1ml
Complement C3 英文名称: 过敏毒素C3(补体C3)抗体 ?0.1ml
CD66c 英文名称: 癌胚抗原相关细胞粘附分子抗体 ?0.1ml
CPEB1 英文名称: 细胞质多聚腺苷酸结合蛋白1抗体 ?0.1ml
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次使用说明书CST7 英文名称: 半胱氨酸蛋白酶YZ剂7抗体 ?0.1ml
C22orf29 英文名称: 22号染色体开放阅读框29抗体 ?0.2ml
Contactin-1 英文名称: 神经细胞表面蛋白F3 ?0.2ml
Cathepsin C/DPP1 英文名称: 组织蛋白酶C抗体 ?0.1ml
Caspase 4 英文名称: 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗体 ?0.1ml
caspase-3 p12 subunit 英文名称: 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗体 ?0.1ml
C7ORF61 英文名称: 7号染色体开放阅读框61抗体 ?0.2ml
Claudin 11 英文名称: 少突胶质细胞跨膜蛋白抗体 ?0.1ml
CD80 英文名称: 刺激分子B7-1蛋白抗体 ?0.1ml
C5b-9 英文名称: 末端补体复合物抗体 ?0.2ml
沉淀法 miRNA 分离试剂盒50 次使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)