磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
大鼠E选择素(E-Sel)ELISA试剂盒 Rat TRAIL-R4 ELISA Kit
大鼠E钙黏蛋白/上皮钙黏蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒 Rat TRAIL R3 ELISA Kit
大鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒 Rat TRAIL-R1 ELISA Kit
大鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL ELISA Kit
大鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit
大鼠C型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒 Rat tumor necrosis factor γ,TNF-γ ELISA Kit
大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 Rat Tumor necrosis factor α ,TNF-α ELISA kit
大鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 Rat tumor necrosis factor(ligand)superfamily, member 14,TNFSF14 ELISA kit
大鼠CXC趋化因子受体5(CXCR5)ELISA试剂盒 Rat cytokine-induced neutrophil chemoattractant,CINC ELISA Kit
大鼠CXC趋化因子受体4(CXCR4)ELISA试剂盒 Rat Plasma membrane calcium-transporting ATPase 2,PMCA Elisa kit
大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒 Rat Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit
大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 Rat fatty acid binding protein 4,adipocyte(FABP4)ELISA kit
大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)ELISA试剂盒 Rat fatty acid synthase,FAS ELISA kit
大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒 Rat Adipose Triglyceride Lipase,ATGL ELISA Kit
大鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit
CDMP1 英文名称: 软骨衍生形态发生蛋白1抗体 ?0.2ml
Beta-casein 英文名称: β-酪蛋白抗体 ?0.1ml
c21orf63 英文名称: 21号染色体开放阅读框63抗体 ?0.2ml
C4orf52 英文名称: 4号染色体开放阅读框52抗体 ?0.2ml
C4orf40 英文名称: 4号染色体开放阅读框40抗体 ?0.2ml
Cullin 3 英文名称: Cullin3抗体 ?0.2ml
CDC40 英文名称: 细胞分裂周期同源蛋白40抗体 ?0.2ml
CCDC106 英文名称: 卷曲螺旋结构域蛋白106抗体 ?0.2ml
CHMP1A 英文名称: 染色质修饰蛋白1A抗体 ?0.2ml
CPN10 英文名称: 叶绿体伴侣蛋白抗体(苹果) ?1ml
CDC20B 英文名称: 细胞分裂周期蛋白20B抗体 ?0.2ml
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次使用说明书Cell division control protein septin D1 英文名称: 细胞周期调控蛋白D1抗体 ?0.2ml
ccnb1ip1 英文名称: 周期蛋白B1结合蛋白1抗体 ?0.2ml
Cdc14A 英文名称: 细胞周期调控因子14A抗体 ?0.1ml
C7orf12 英文名称: 第七号染色体开放阅读框12抗体 ?0.2ml
CA XI 英文名称: 碳酸酐酶11抗体 ?0.2ml
Alpha casein 英文名称: α酪蛋白抗体 ?0.2ml
CDCREL 英文名称: 细胞周期调控相关蛋白1 ?0.2ml
ICAM1 英文名称: 细胞间粘附分子1抗体 ?0.1ml
CD105 英文名称: CD105抗体 ?0.1ml
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)