大片段 DNA 分子量标准50μg使用说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
大片段 DNA 分子量标准50μg使用说明书操作说明:
1.将待测种子用温水(30-35℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2.随机取种子100粒,沿种胚ZX线纵切为两半,将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中,备用。
3.(可选)可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min,杀死细胞,作为阴性对照。
4.向含有种子的培养皿中加入TTC溶液,以浸没种子为度。
5.放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6.倒出TTC染色液,用自来水冲洗2~3次,立即观察种子着染况。
大片段 DNA 分子量标准50μg使用说明书主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度Z高,杂质含量Z低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
十氢萘 Sodium hypophosphite AR,99.5% M83669 1克
1-溴代庚烷 Sodium metaborate tetrahydrate AR,98% M83670 100克
1-溴代辛烷 Sodium metaphosphate CP,99% M83671 500克
溴代十六烷 Trisodium trimetaphosphate CP,98% M83672 100克
氯代十六烷 Sodium orthovanadate CP M83673 500克
碘代十六烷 TSP AR,99% M83674 100克
氯代癸烷 Sodium phosphotungstate CP,98% M83675 500克
1,4-二溴丁烷 STPP 工艺级,90% M83676 1克
十二烷 Sodium metasilicate nonahydrate CP,70% M83677 5克
十三烷 Sodium stannate CP,98.5% M83678 20毫克
十四烷 Sodium tungstate dihydrate CP,97% M83679 100毫克
十六烷 1-Naphthyl phsophoric acid sodium salt AR,98% M83680 1克
十七烷 2-Naphthyl phosphate sodium salt AR,99% M83681 5克
十九烷 Sodium bitartrate monohydrate 高纯,99% M83682 1克
二十七烷 Sodium formate 高纯,99% M83683 5克
二十八烷 Sodium dodecanoate 超纯,99% M83684 1克
三十六烷 Sodium oleate 超纯,99% M83685 5克
焦碳酸二乙酯 Sodium stearate IPC,98% M83686 1克
4-N,N-二甲基氨基偶氮苯-4-异硫氰酸酯 PAAS IPC,98% M83687 5克
萘酚AS-TR乙酸酯 Sodium azide IPC,98% M83688 100克
萘酚AS-TR磷酸盐 Resorinol IPC,99%
Anti-EPEC/E.coli /Gold 胶体金离子标记抗肠致病性大肠杆菌抗体IgG 0.2ml
Anti-EPEC-O6/Gold 胶体金离子标记大肠埃希杆菌O6抗体IgG 0.2ml
Anti-E.coli O139/Biotin 生物素标记抗志贺毒素大肠杆菌O139抗体IgG 0.2ml
Anti-E.coli O139/Gold 胶体金离子标记抗志贺毒素大肠杆菌O139抗体IgG 0.2ml
Anti-E.coli O157/Gold 胶体金离子标记抗大肠埃希氏菌O157抗体IgG 0.2ml
Anti-E.coli O157/Biotin 生物素标记抗大肠埃希氏菌O157抗体IgG 0.2ml
Anti-Dysferlin/FITC 荧光素标记Dysferlin蛋白抗体IgG 0.2ml
大片段 DNA 分子量标准50μg使用说明书Anti-EPEC/E.coli /Biotin 生物素化兔抗肠致病性大肠杆菌抗体IgG 0.2ml
Anti-E.coli/Biotin 生物素化兔抗普通大肠埃希菌菌体蛋白抗体IgG 1ml
Anti-E2F1/FITC 荧光素标记转录因子E2F-1抗体IgG 0.2ml
Anti-E2F2/FITC 荧光素标记转录因子E2F-2抗体IgG 0.2ml
Anti-E2F3/FITC 荧光素标记转录因子E2F-3抗体IgG 0.2ml
Anti-E2F4/FITC 荧光素标记转录因子E2F-4抗体IgG 0.2ml
Anti-E2F5/FITC 荧光素标记转录因子E2F-5抗体IgG 0.2ml
Anti-E2F6/FITC 荧光素标记抗转录因子E2F-6抗体IgG 0.2ml
Anti-E2 tag/FITC 荧光素标记E2 tag标签抗体IgG 0.2ml
Anti-E2 tag/HRP 辣根过氧化物酶标记E2 tag标签抗体IgG 0.2ml
Anti-E7 protein/FITC 荧光素标记人乳头瘤病毒16型E7抗体IgG 0.2ml
Anti-EAAT1/Glast /FITC 荧光素标记胶质细胞谷氨酸运载蛋白1 抗体IgG 0.2ml
Anti-EAAT2/FITC 荧光素标记抗胶质细胞谷氨酸运载蛋白2抗体IgG 0.2ml
Anti-EAAT3/FITC 荧光素标记抗胶质细胞谷氨酸运载
大片段 DNA 分子量标准50μg使用说明书
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)